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PAGE PAGE 31 中药显微鉴定技术 实训一 显微镜的使用保养与中药临时制片技术 一、显微镜的使用保养 1、 结构 镜坐,镜臂,镜筒,载物台,光路系统(目镜,物镜,集光器,光源). 2、 物镜 低倍镜：4×、10 ×——用于观察整体结构、寻找特定特征。 高倍镜：40 ×、100 ×（油镜）——用于观察特定细微结构与组织特征，油镜较为少用。 3、 使用注意与技巧 先低倍后高倍，即先整体后局部；之字形扫描式寻找需要观察的特征；由低倍镜转成高倍镜后，只能使用微调；高倍镜观察时，应通过控制光源强度、集光器高低、虹彩光阑的张合，并结合微调，使被观察物清晰。 4、 使用过程及使用后的保养 显微制片必须将多余的装置液清理干净，以免沾染镜头。如目镜与物镜被沾染，则以镜头纸从中央向四周以划圆圈的方式擦拭。必要时还要使用去污剂擦拭。使用完毕后，移去玻片，按上述方法擦拭，将最低倍物镜转入光路，载物台复位。关闭电源，拔下插座，盖上防尘罩。 二、粉末临时制片 1、 粉末临时制片操作要领 ①粉末用量：米粒大小，尽可能少。②每次滴加装置液2~3滴。③每次滴加装置液后需要搅拌均匀。 ④控制搅拌范围约为盖玻片大小。⑤如加热透化，则重复进行3~4次，沸即离火，勿烧干、焦。 ⑥加盖玻片时应先一侧接触装置液，缓缓放下，最后抽出镊子，以排除气泡。 ⑦以吸水纸吸去溢出的装置液。⑧稍放置后，镜检。 2、 水装片或斯氏液装片 适用于观察淀粉粒。装置液：蒸馏水或斯氏液（甘油醋酸）。不可加热，否则淀粉粒糊化。 天花粉粉末—淀粉粒 3、 水合氯醛加热透化装片 适用于除淀粉粒、菊糖以外的组织、细胞、细胞后含物的观察。 装置液：水合氯醛（水合三氯乙醛）、稀甘油。需要加热。 天花粉粉末——石细胞 天花粉粉末——具缘纹孔导管 4、 水合氯醛或乙醛装片 适用于观察菊糖。装置液：水合氯醛或乙醇。不可加热，否则菊糖溶解。 党参菊糖（水合氯醛装置） 5、 水合氯醛装置液的作用 使细胞膨胀,便于观组织、细胞及其内含物特征。去除细胞表面或内部杂质。增强透明度。 6、 稀甘油装置液的作用 增加透明度。防止气泡生成。防止水合氯醛结晶析出。 三、整体透化装片 目的：避免出现有些组织在粉末中破碎或不完整而影响观察。 材料：多为叶或花。 操作：切或剪取叶或花约4mm2 ，外表朝上，透化后观察。 装置液：水合氯醛、稀甘油。 需要加热。 金银花两种非腺毛 金银花腺毛 金银花花粉粒 四、叶表皮撕片 适用对象：观察表皮细胞、气孔、毛茸。 材料：通常为叶下表皮。 操作：以镊子自下表面夹住少许叶片，往一侧撕取表皮。将撕下的表皮外表面朝上置于滴有1~2滴水的载玻片上，使其自然展开，盖片观察。 何首乌叶下表皮组织 五、 徒手制片 1、目的与材料 目的：观察组织构造、细胞特征； 材料：新鲜、干燥或经固定的材料 取材：材料分割成适当大小，直径必须小于盖玻片。 材料软化或冲洗：坚硬的干燥材料于稀甘油10％醋酸液中煮至表面无气泡。 固定材料需在流水中冲洗12小时以上。 2、操作 取新鲜或已软化的中药材，用拇指及食指和中指夹住材料，下端用无名指托住，另外一只手持刀片，自左向右移动手腕，牵曳切片。 操作时材料的断面与刀口须经常用水湿润。 以毛笔将切好的薄片移入在盛水培养皿中浸泡。将切片以镊子夹出，置于滴加了甘油的载玻片上，加上盖玻片；或滴加水合氯醛加热透化，滴加稀甘油后加上盖玻片。 3、常用固定液——FAA固定液 70％乙醇 90ml 福尔马林（37％~40％甲醛） 5ml 冰醋酸 5ml 徒手切片——桑枝横切面  实训二 川贝母与浙贝母粉末鉴定 一、教学目标 1.会用斯试液做粉末装片，能够在显微镜下分辨出川贝母与浙贝母淀粉粒的主要不同。 2.能使用显微测微尺测量淀粉粒的大小。 3.会用显微化学方法鉴别淀粉粒与非淀粉粒 4.会对川贝母浙贝母进行显微描述、显微绘图 二、实验仪器、试剂及材料 1.幻灯机、视频数字显微镜和普通光学显微镜 2.斯试液、稀碘液 3.川贝母、浙贝母粉末 4.川贝母、浙贝母 幻灯片、载玻片、盖波片、目镜测微尺、镜台测微尺、镊子、大针 三、制片方法： 1.斯式液装片。 2.显微化学鉴别方法：淀粉＋碘液—→兰紫色 四、显微鉴别 （一）川贝： 粉末类白色。四种来源的共同特点是：淀粉粒极多，为粉末的主体，也为鉴别要点。 1. 淀粉粒(starch)：甚多，广卵形、长圆形或不规则形，有的边缘不平整或略作分枝状，直径5~64μm，脐点短缝状、点状、人字状或马蹄状，层纹隐约可见。 2. 表皮细胞(epidermis cell)：类长