中小学课件植物的组织培养技术课件.pptVIP

高 频 考 点 植物的组织培养 实 验 要 求 1.细胞分化与细胞全能性的生产应用。 2.植物组织培养的基本原理及其培养条件。 3.影响植物组织培养的因素。 4.植物激素在植物组织培养中的作用。 第五章　植物的组织培养技术 1．月季组织培养过程 离体月季组织 形成愈伤组织 长出芽、根等器官 月季植株。 2．无菌操作 (1)培养材料消毒。 (2)培养基和操作器材均应进行灭菌处理。培养基常采用高压蒸汽灭菌，操作器材可采用干热灭菌。 (3)操作室、工作台要进行消毒，一般使用紫外线或消毒药品消毒。 (4)所有接种、转瓶操作都应在酒精灯火焰旁进行。 (5)操作人员要对手消毒、戴口罩、穿工作服等，操作时禁止说话。 1．内因 (1)植物的种类； (2)同一植物材料的年龄； (3)保存时间的长短等。 特别提醒：一旦发现培养物被污染，特别是真菌性污染，一定不要打开培养瓶。应先将被污染的培养瓶统一放在高压蒸汽锅内进行高压蒸汽灭菌，然后再打开培养瓶进行清理。 　生长素和细胞分裂素是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键性激素，其作用及特点为： 激素使用 实验结果 使用 顺序 先生长素后细胞分裂素 有利于细胞分裂 先细胞分裂素后生长素 细胞既分裂也分化 生长素与细胞分裂素同时使用 分化频率提高 生长素用量与细胞分裂素用量的比例 该比值高时 利于根的分化，抵制芽的形成 该比值低时 利于芽的分化，抵制根的形成 该比值适中时 促进愈伤组织的生长，诱导根芽分化 特别提醒：实验操作中应注意的几个问题 (1)材料的选取：菊花的组织培养实验中，应选择未开花植株的茎上部新萌生的侧枝；月季花药的培养实验中，应选择花粉发育过程中的单核靠边期的花粉进行培养。 (2)外植体消毒：所用消毒剂为体积分数为70%的酒精和质量分数为0.1%的氯化汞溶液，所使用的清洗液是无菌水。 (3)培养过程：在初期，菊花的组织培养需光照，月季花药的培养不需光照，而在后期均需光照。 1．利用植物组织培养的方法可快速、大量繁殖植物，在培养过程中，取该植物的花芽并将其分别培养在含有不同比例的吲哚乙酸和细胞分裂素的培养基中，花芽的生长状况如下表所示： 吲哚乙酸 细胞分裂素 花芽生长状况 A组花芽 0 0 组织切块 B组花芽 3 ppm 0.2 ppm 形成愈伤组织 C组花芽 3 ppm 0.002 ppm 愈伤组织分化出根 D组花芽 0.03 ppm 1.0 ppm 愈伤组织分化出嫩枝 E组花芽 0 0.2 ppm 稍生长 (1)在此过程中能实现脱分化的花芽是________组。从实验结果可以看出，能诱导新的花芽形成的条件是 ____________________________________________________ 。 (2)上述实验结果说明，在植物组织培养过程中，诱导芽和根形成的关键是____________________。在生产实践中，欲快速、大量获得此植物的花芽，可选用________组的培养基进行扩大生产。 解析：脱分化、再分化过程与植物激素——生长素和细胞分裂素有关，且生长素用量与细胞分裂素用量直接影响培养过程。当用量比值高时， 有利于根的分化，抑制芽的分化，即表中的C组；当用量比值低时，有利于芽的分化，抑制根的分化，即表中的D组；当比值适中时，有利于促进愈伤组织的生长，即表中的B组。欲快速、大量获得此植物的花芽，必须首先获得大量的嫩枝。 答案：(1)B、C、D　细胞分裂素浓度大于生长素浓度　(2)培养基中细胞分裂素含量与生长素含量之间的比例(或培养基中细胞分裂素与生长素的浓度比)　D 【例1】 (2009·山东高考)人参是一种名贵中药材，其有效成分主要是人参皂苷。利用细胞培养技术生产人参皂苷的大致流程如下： 请回答： (1)配制诱导愈伤组织的固体培养基，分装后要进行________。接种前，要对人参根进行________。 (2)用于离体培养的根切块，叫做________。培养几天后发现少数培养基被污染，若要有颜色的绒毛状菌落，属于________污染；若是有光泽的黏液状菌落，属于________污染。 (3)用少量________酶处理愈伤组织，获取单细胞或小细胞团，在液体培养基中进行悬浮培养，可有效提高人参皂苷合成量。 (4)人参皂苷易溶于水溶性(亲水性)有机溶剂，从培养物干粉中提取人参皂苷宜选用________________