公猪精液采精与稀释.pdfVIP

公猪采精与稀释操作规程 1、采精与精液处理流程 （讲究卫生，控制温度） （1）采精过程流程 1、 进入实验室后清洁双手 2、 准备稀释液，并将稀释液放入 35℃水浴锅中升温 3、 打开显微镜上的加热板控制开关，设定温度到 38℃ 4、 安装集精杯（预热到 37℃），准备其它采精用品，放入壁厨 5、 将公猪赶入采精室，关上栅栏，清洁其体表 6、排出包皮液用 0.1％KMnO4 溶液清洗其腹部及包皮，再用清水洗净，抹干。 7、 戴上双层手套，诱导公猪爬跨假母猪 8、 锁定并拉出阴茎 9、 待排出部分清亮液体后，开始收集精液 10、将集精杯放入壁厨 11、将公猪赶回圈内 （2）精液处理操作流程 1．将一预温后的烧杯或塑料杯放在电子秤上，打开电子秤，当显示为零时， 将装精液的食品袋从集精杯中取出放入杯中，显示读数为精液的重量。 2．将放精液的烧杯轻轻摇匀精液后，放入 35℃的水浴锅中与稀释液等温。 3．立即用取样器取精液 10～25 微升左右，滴在载物台上预热的载玻片上， 盖上盖玻片，估测活力。精子活力大于 0.6，则可用于下一步的处理。 4．另取 1 毫升精液放入加有 10 毫升生理盐水的精子密度杯中，读出读数后， 在查对表上查到精子密度值。 5．计算精液可分装的份数和最终的精液体积或重量。 6．将大烧杯放在电子秤上，除皮，然后再将精液袋放入其中，并将精液袋 上口翻在杯沿外，将装稀释液的三角瓶从水浴锅中取出，擦去底部水分，将稀释 液加入大烧杯中，直到达到计算的最终重量，轻轻摇动或用玻璃棒搅拌精液使其 混合。 7、精液稀释后，检查精液活力，若无明显下降，开始分装。 8．将精液按规定重量分装于各个精液瓶（袋）中，排出空气后封口，进行 精液标记，置 22℃-25℃的室温 1 小时后(或用几层毛巾包被好后)，降温到 20℃ 左右时直接放置 17℃冰箱中。 9．清洗各种容器并放于消毒柜中干燥消毒。 1 2、稀释液的配制过程 2.1 配制过程 以 1000 毫升 BTS 稀释液为例，可用任一方法： ①经过清洗干燥消毒的三角瓶，将一袋 BTS 稀释粉（50 克）全部加入瓶中， 用量筒量取双蒸馏水 1000 毫升，加入三角瓶中。盖上盖子或用稀释粉袋套在三 角瓶口上，封紧摇动，使稀释粉完全溶解。或放在磁力搅拌器上，搅拌加速溶解。 取下盖子，放入 35℃的水浴锅中预温。 　稀释液用过后，三角瓶应用蒸馏水冲洗，空干水分，然后将三角瓶、量筒 用牛皮纸封口，放入 80～120℃的消毒柜或干燥箱中烘干。 ②将两个食品袋相套放入大烧杯中或塑料杯中，放在电子秤上，打开电子秤 开关，当电子秤上读数为零时， 将连接蒸馏水容器的硅胶管放出少量水后，将管口对准杯口注水，并注意读 数变化，当接近 1000 克时，应放慢流速，改为滴注，直到 1000 克。之后，应将 蒸馏水管的龙头套好，防止污染。 在大烧杯中加入一袋稀释粉（50 克）。 从盛磁珠的小烧杯中取镊子并夹取磁珠，在废液缸上用洗瓶冲洗磁珠 2-3 次， 待磁珠上水分滴净后，放入烧杯中，然后将烧杯放在磁力搅拌器上，打开电 源开关和加热开关，调整磁珠转速旋扭，使磁珠以适当速度旋转（水体形成涡流）， 使稀释粉全部溶解后，降低磁珠转速，关闭加热和电源开关。 将杯子放入 35℃的水浴中预温。 注：不能控温的加热磁力搅拌器使用时间不可超过 10 分钟，或及早关闭加 热电源；平时磁珠放在一个清洗干燥过的小烧杯中，注入新鲜蒸馏水半杯，镊子 为不锈钢材料，也经清洗干燥放入杯中，盖上干净的培养皿，每 3 周应换掉陈水， 冲净换上新的蒸馏水。稀释液加入精液中后，应用小烧杯中的镊子将磁珠从大烧 杯中夹出，并在废液缸上冲洗磁珠和镊子前端 3-4 遍，待磁珠上水分滴净后，连 同镊子放入小烧杯中，盖上培养皿。 2 这种方法由于稀释液是在一次性食品袋中配制的，因此，不需要对配制稀释 液的容器进行清洗和消毒，实现了稀释液配制的免消毒。