发酵过程控制技术 05-03发酵液中还原糖含量的测定 发酵液中还原糖含量的测定——引导文.doc

天津现代职业技术学院 PAGE 9 学习手册 《子情境：发酵液中还原糖的测定》 引导文-单元设计-技能考核标准-实训指导书 引导文 酶制剂发酵过程检验--发酵液中还原糖含量的测定 背景材料 背景材料 关于酶制剂 酶制剂是一类从动物、植物、微生物中提取具有生物催化能力的蛋白质。具有高效性，专一性，在适宜条件下具有活性。 酶制剂生产方式：从动、植物细胞提取，微生物发酵法。 关于酶的用途，你知道哪些？ 关于酶的用途，你知道哪些？ 材料一：糖化酶的概述 糖化酶又称葡萄糖淀粉酶,糖化酶是一种习惯上的名称,学名为α-1,4-葡萄糖水解酶(α-1,4-Glucan glucohydrolace)。糖化酶是由曲霉优良菌种（Aspergilusniger）经深层发酵提炼而成。糖化酶，又称葡萄糖淀粉酶[Glucoamylase,(EC.3.2.1.3.)]它能把淀粉从非还原性未端水介a-1.4葡萄糖苷键产生葡萄糖，也能缓慢水解a-1.6葡萄糖苷键，转化为葡萄糖。 　　本产品广泛用于生产白酒、黄酒、酒精、啤酒；用于以葡萄糖作发酵培养基的各种抗生素、有机酸、氨基酸、维生素的发酵；本品还大量用于生产各种规格的葡萄糖。总之，凡对淀粉、糊精必需进行酶水解的工业上，都可适用。 　　产品特性 　　1. 作用方式：糖化酶的底物专一性较低，它除了能从淀粉链的非还原性未端切开a-1.4键处，也能缓慢切开a-1.6。因此，它能很快的把直链淀粉从非还原性未端依次切下葡萄单位，在遇到1.6键分割，先将a-1.6键分割，再将a-1.4键分割，从而使支链淀粉水解成葡萄糖 　　2. 作用条件：本品随作用的温度升高活力增大，超过65℃又随温度升高而活力急剧下降，本品是最适作用温度是60-62℃。最适作用PH舒值在4.0-4.5左右 　　使用糖化酶的优点 　　1、 糖化酶对设备没有腐蚀性，使用安全。使用糖化酶工艺简单、性能稳定、有利于各厂的稳定生产。 　　2、 使用糖化酶对淀粉水解比较安全，可提高出酒率， 麸曲法能减少杂菌感染，节约粮食可降低劳动强度，改善劳动条件。 　　3、 使用糖化酶有利于生产机械化，有利于实现文明生产。 　　注意事项 　　本品使用时最适PH4.0-4.5，淀粉糖和味精生产时应先调PH，后加酶糖化。用酶量随原料、工艺不同而变化，要缩短糖化时间需增加用量。 　　淀粉质原料必须与酶充分接触，接触面积大，时间长，效果好。间歇糖化要搅拌充分，连续化必须流量均匀。温度需严格控制60℃-62℃，保温时温度均匀，严禁短期高温。 　　运输、贮存 　　本品对温度、光线、湿度都很敏感，运输贮存时尽可能做到避免曝晒、高温、潮湿、保持清洁、阴凉和干燥，能低温保存更好。 思考一下： 对糖化酶有哪些认识？ 对糖化酶有哪些认识？ 相关资料 相关资料 材料一、发酵过程中的还原糖测定方法 单糖和某些寡糖含有游离的醛基或酮基，有还原性，属于还原糖。而多糖和蔗糖等属于非还原性糖；利用多糖能被酸水解为单糖的性质可以通过测定水解后的单糖含量对总糖进行测定。 发酵工艺控制是通过一系列工艺参数来实现的。这些参数中包括物理参数，即温度、压力等。二是化学控制系数，即pH、糖的浓度等；其中糖的浓度是控制发酵过程中的重要参数之一。由于碳源对于发酵过程菌体生长及产物合成都有较大影响。因此，测知发酵过程中还原糖浓度变化，对发酵控制有重要的指导意义。 还原糖的测定方法有很多，一般有菲林试剂法、酶法和DNS法。 A、菲林试剂法 菲林试剂由质量浓度为0.1g/mL的NaOH溶液和质量浓度为0.05g/mL的CuSO4溶液配制而成，二者混合后，立即生成淡蓝色的Cu(OH)2沉淀。Cu(OH)2在加热条件下与醛基反应，被还原成砖红色的Cu2O沉淀，醛基则被氧化为羧基。 利用菲林溶液与还原糖共沸，生成氧化亚铜沉淀的反应，以次甲基蓝为指示液，以样品或经水解后的样品滴定煮沸的菲林溶液，达到终点时，稍微过量的还原糖将蓝色的次甲基沉还原为无色，以示终点。根据样品消耗量求得总糖或还原糖的含量。 用菲林试剂鉴定可溶性还原糖时，溶液的颜色变化过程为：浅蓝色→棕色→砖红色(沉淀)。 B、酶法 又称葡萄糖氧化酶－过氧化物酶法。葡萄糖氧化酶可将葡萄糖氧化成葡萄糖酸并产生过氧化氢，后者与苯酚及安替比林在过氧化物酶作用下生成红色化合物，葡萄糖的浓度与红色深浅成一定比例。 一般可采用葡萄糖测定的试剂盒，测定方法简单、快速 C、DNS法 又称3，5－二硝基水杨酸法。在碱性溶液中，还原糖变为烯二醇，烯二醇可被3，5－二硝基水杨酸氧化为糖酸。加热进一步产生一种棕红色的氨基化合物。在一定浓度范围内，还原糖的量与棕红色物质的深浅成一定比例关系，通过此比例测定还原糖的含量。 三种方法各有不同的应用和使用范围，应根据具体情况选择。例