大豆转座子Tgm9的转座酶与非自主转座子相互作用的研究.pdf

摘要 W 大豆花色素的合成过程中是由许多基因控制的，其中 基因控制了大豆花和下胚 4 W 轴的颜色，编码二氢黄酮还原酶。大豆植株含有野生型的 基因时，大豆植株开紫色 4 W w 花，下胚轴也是紫色。 基因突变为纯合隐型 基因时，大豆植株开白色花，下胚轴 4 4 是绿色。在大豆不稳定系发现大豆花色和下胚轴的颜色是杂斑 （叶片有白色和紫色斑 点）。后来证明是由于大豆中的活性转座子Tgm9 （Transposon Glycinemax）插入DFR2 基因导致的。 大豆转座子Tgm9 的全长约为20 kb ，属于CACTA 型的活性转座子。由包含有末端 Tgm9 27 2 反向重复序列的非自主转座子元件和转座酶元件构成。 有 个外显子以及 个开 放阅读框ORF 1 和ORF2 ，分别编码 GmTNP2 1060 aa GmTNP 1 750 aa 转座酶 （ ）和 （ ）。其结构完整，序列明确，但是 其转座机制仍然不清楚。将转座酶GmTNP2 保守的蛋白序列进行对比发现，GmTNP2 Tam1 TNP2 32% En/Spm TNPD 46% 与金鱼草 的 有 的相似性，与玉米 的 有 的相似性。 因此推测大豆转座子Tgm9 的转座机制类似于玉米En/Spm 的转座机制。 为了验证关于大豆转座子Tgm9 转座机制的猜想，本研究主要从两个方面来探究。 im immutans gun5 genome uncoupled 首先探究转座子在拟南芥中的活性， （ ）和 （ ）突变 im 体作为植物材料，表型容易观察。拟南芥 突变体的表型呈现花斑，叶片由白色组织 PTOX plastid 和绿色组织构成，对光很敏感。叶片的白色部分是由于质体末端氧化酶 （ terminal oxidase,PTOX ）的缺失导致叶片有白色组织。拟南芥gun5 突变体的表型呈现黄 Gun5 Mg- Mg-chelatase H 绿色。 基因编码了 鳌合酶 （ ）的 亚基，在叶绿素生物合成中起 T-DNA Gun5 AtChlH Gun5 作用。 插入 的 的启动子区，降低了 基因的表达，导致植株 Tgm9 3 dTgm9-1:4.5 kb 叶片表型偏黄。我们将 缩短为 种不同片段长度的非自主转座子（