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摘要
摘要
研究背景:现阶段肥胖人群日趋增多,肥胖引发的一系列疾病对社会和个人造成
危害。现有的治疗肥胖的方法,因为副作用多而不被推崇使用。中药方剂,因为药物
巧妙地配伍关系,搭配使用治疗疾病的同时可以避免单一药物的偏性副作用,同时因
为多种药物共同使用,所以可以多靶点全方位对疾病进行治疗,因此具有安全有效的
特点。
研究目的:探索中药组方对肥胖小鼠的肠道功能改善作用以及如何通过改善的肠
道功能来影响小鼠的糖脂代谢
研究方法:领取4 周龄左右的C57BL/6J 雄性小鼠,随机分为5 组,每组8 只进
行分笼喂养。在小鼠喂养的第一周先进行普通饲料喂养,从第二周开始,药物高、中、
低剂量组和高脂对照组小鼠进行高脂饲料喂养,空白对照组进行普通饲料喂养。在小
鼠喂养8 周后开始进行药物处理,期间不更换小鼠饲料类型。其中中药组方高剂量组
− 1 − 1 − 1 − 1
药物浓度为(26g·kg ·day )(HHF ),中剂量组药物浓度为(13g·kg ·day )(MHF ),
低剂量组药物浓度为(6.5g·kg− 1·day− 1 )组(LHF ),高脂对照组(HF)和空白对照组(Con)
小鼠每天灌服0.9% 的生理盐水。
1、 给药期间每天记录小鼠的体重变化情况,以此来观察不同剂量组的药物疗效。
2、 采用实时定量荧光PCR (QRT-PCR )实验检测小鼠小肠和结肠组织的IL-10、
IL-6、SOD、GLP-1、Ghrelin 、5-HT2c 、Tph1 、Tph2、Occludin 和ZO-1 基
因的表达情况。
3、 采用蛋白免疫印迹法(Western blot )检测小鼠肌肉和脂肪组织的P-AKT ,小
鼠小肠和结肠组织的ZO-1 和Occludin 的蛋白表达情况。
4、 通过Power Lab 多导生理记录仪来检测各组小鼠的小肠运动功能。
5、 通过ELISA-kit 试剂盒,检测小鼠血清中GLP-1、5-HT 、IL-10、IL-6 、ZO-
1 的蛋白表达水平。
6、 对小鼠粪便菌群进行 16S 测序,检测给药组小鼠的肠道菌群和对照组小鼠肠
道菌群的差异,并进行菌群恢复,观察小鼠表型变化。
研究结果:
1、 中药组方可以改善肥胖小鼠的表型。用三种剂量的药物进行灌胃,发现高剂
I
西北大学硕士专业学位论文
量和中剂量组小鼠体重都有明显下降且差距不大,低剂量组药物小鼠体重下
降不明显,考虑到高剂量药物可能会对小鼠产生毒副作用,最终我们选择了
中剂量组药物进行后续的实验。通过两周的灌胃给药,可以明显看出HF Med
组小鼠体重与 HF 组相比有明显的降低(P0.05 ),肌肉与脂肪 P-AKT 蛋白
的表达量与HF 组相比,也有上调(P0.05 )。
2、 中药组方影响胃肠道内分泌肽的分泌。HF Med 组小鼠的小肠和结肠的GLP-
1、CCK、PYY 的表达量与HF 组相比,均有升高(P0.05 )。HF Med 组小
鼠的血清中GLP-1 的表达与小鼠小肠和结肠组织的mRNA 的表达具有一致
性,均是HF Med 组高于HF 组(P0.05 )。
3、 HF Med 组小鼠小肠和结肠组织的 IL-6 的 mRNA 的表达低于 HF 组
(P0.05 ),IL-10 和SOD 的mRNA 的表达高于HF 组(P0.05 ),HF Med 组
小鼠小肠和结肠的ZO-1、Occludin 的蛋白表达水平均高于HF 组(P0.05 ),
HF Med 组小鼠的IL-10、IL-6
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