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膨润土对铜污染土壤酶活性的影响 随着工农业的快速发展，大量含有重金属的废水、废渣进入农田，导致土壤环境质量进一步恶化。土壤重金属污染修复是当前土壤学和环境科学面临的挑战之一。土壤酶活性作为表征土壤质量变化的重要指标，可用于评价土壤铜污染状况。铜作为典型的土壤重金属污染元素之一，是当今研究的热点之一，相关铜污染对土壤酶活性的影响，目前的研究报道较少。陈怀满研究表明，重金属可通过破坏酶的活性位点和空间结构，导致土壤中酶的活性下降；也可以通过抑制微生物的生长、繁殖，减少微生物体内酶的合成和分泌，最终使单位土壤中酶的活性降低。然而，与铜污染密切相关的脲酶、硝酸还原酶、过氧化氢酶、纤维素酶、磷酸酶、水解酶等大多土壤酶，其活性大都受到铜的抑制[4-5]。研究认为，重金属铜在含量较高和较低时都可对土壤酶活性产生钝化或抑制作用，前者可能是大量铜离子与酶蛋白的沉淀所致；而含量较低时的抑制作用，可能是因为金属离子与某些酶分子的巯基、胺基和羧基的结合。因此，利用土壤中的酶活性来评价土壤铜污染的修复效果是科学合理的方法。 粘土矿物膨润土是一种具有较强吸附性、阳离子交换性、粘着性等特性的环保材料，当前被广泛用于重金属污染的土壤和水体的环境治理。笔者通过膨润土对铜污染土壤酶活性的影响，以期为膨润土修复重金属污染土壤提供一定的参考价值和科学依据。 1 材料与方法 1.1 试验时间、地点 盆栽试验于20XX4月在山西农业大学资源环境学院试验基地大棚内进行，室内分析测定于20XX5月20日在山西农业大学资源环境学院环境监测实验室进行。 1.2 试验材料 盆栽试验用土为山西省太谷县石灰性褐土；供试膨润土采自山西省浑源县；供试作物为油菜（Brassica campestris L. ssp. chinensis L.），品种为‘四月蔓’，生育期45天。 供试肥料为尿素（含N量为46%）、KH2PO4（含P2O5量为52.2%，含K2O量为34.6%）和K2SO4（含K2O量为64.4%），供试铜源为CuSO4·5H2O（含Cu量为25.6%）。供试土壤和膨润土基本理化性质见表1。 1.3 试验方法 1.3.1 试验设计 试验在山西农业大学资源环境学院试验基地大棚内用盆栽法进行，采用2因素6水平完全组合设计，因素1为膨润土施用量，设0 g/kg（-P）和30 g/kg（+P）土2个水平；因素2铜施用量，设0、200、300、400、500、600 mg/kg 6个水平，以代表不同铜污染程度。完全组合共12个处理，4次重复。盆钵采用22 cm×18 cm塑料盆，每盆装风干土5 kg，底部装入石砾1 kg，在石砾中插入1根PVC管用于生育期灌水。每盆以尿素、KH2PO4和K2SO4施入N 0.2 g/（kg·土）、P2O5 0.261 g/（kg·土）、K2O 0.272 g/（kg·土）作为基肥。外源铜为CuSO4·5H2O，按试验设计以溶液形式施入，施入膨润土，与土壤混匀后浇水平衡1个月。 油菜于20XX4月5日种植，待油菜生长到2～ 3 cm时，每盆选择长势基本一致的幼苗定植10株，生长期间保持田间持水量的80%，并依次轮换盆钵位置，按常规方法管理。于20XX5月20日收获后，采集土样用于土壤酶分析。 1.3.2 测定方法 土壤脲酶活性采用苯酚钠-次氯酸钠比色法测定；土壤磷酸酶活性采用磷酸苯二钠比色法测定；土壤过氧化氢酶活性采用高锰酸钾滴定法测定；土壤硝酸还原酶活性采用酚二黄酸比色法测定。 1.3.3 统计分析 测定数据采用Microsoft Excel 2003和DPS 7.05版软件进行处理和分析，多重比较采用Duncan新复极差法。 2 结果与分析 2.1 膨润土对铜污染土壤脲酶活性的影响 土壤脲酶广泛存在于土壤微生物、动物和植物中，是土壤中的主要酶类之一。早期的一些研究表明：土壤脲酶活性与铜浓度呈显著负相关，在50～100 mg/kg的铜对脲酶的抑制率大于25%，超过100 mg/kg时，铜对土壤脲酶的抑制更加明显。李东坡等认为，土壤脲酶活性及其动态变化可以反映土壤的健康状况及营养水平，且脲酶活性越高土壤健康状况越好，也可作为评价健康土壤的生物学指标。 试验结果表明，随着铜污染程度的增加，土壤脲酶活性呈逐渐降低的趋势，施加膨润土能显著提高土壤脲酶活性（见图1）。在未施加膨润土条件下，随着铜污染程度的增加，土壤脲酶活性分别比空白对照降低了11.3%、19.6%、26.7%、36.5%、41.2%，差异达到显著水平；施加膨润土处理土壤脲酶活性相比未施加膨润土增幅分别为9.1%、6.4%、7.1%、8.4%、15.4%、13.0