微生物发酵产酶ppt演示课件.ppt

第二章 微生物发酵产酶;重点： 微生物细胞中酶生物合成的调节，酶生物合成的模式，酶发酵生产的工艺条件及其控制，提高酶产率的措施，固定化微生物发酵产酶。; 微生物发酵产酶 是指在人工控制的条件下，有目的地利用微生物培养来生产所需的酶，其技术包括培养基和发酵方式的选择，以及发酵条件的控制管理等方面的内容。;在一定的条件下，酶可以催化各种生化反应，并且具有催化效率高、转一性强和作用条件稳定等特点，所以酶在医药、食品、轻工、化工、环保、能源和生物工程等领域广泛应用。;微生物发酵产酶的工艺流程;产酶菌种的筛选;;? 一个优良的产酶菌种应具备以下几点： a 繁殖快,产酶量高，有利于缩短生产周期??? b 容易培养和管理 ??? c 产酶性能稳定，菌株不易退化，不易受噬菌体侵袭??? d 产生的酶容易分离纯化??? e 安全可靠、无毒性;微生物酶的类型 1.胞外酶：细胞内合成而在细胞外起作用的酶。包括位于细胞外表面或细胞外质空间的酶，也指释放入培养基的酶。 大多是水解酶（如淀粉酶、蛋白酶、 纤维素酶、果胶酶），是微生物为了利用环境中的大分子而释放到细胞外的。;2.胞内酶：指合成后仍留在细胞内发挥作用的酶，这些酶在细胞内常与颗粒体结合并有着一定的分布。 如线粒体上分布着三羧酸循环酶系和氧化磷酸化酶系，而蛋白质合成的酶系则分布在内质网的核糖体上。; 酶的发酵生产方式 ①固体培养发酵:把菌种接入固体培养基中,保温数天,用水或缓冲液浸泡培养基,将酶抽提,测定酶活力,这种方法主要适用于霉菌.? 适合于传统发酵工艺及乡镇企业用来生产比较简单的产品。;②液体深层发酵:采用液体培养基,置于生物反应器中，经过灭菌、冷却后，接种产酶细胞，在一定条件下，进行发酵，生产得到所需的酶. 适合于大规模工业化生产。;液体深层发酵优点 ①液体悬浮状态是很多微生物的最适生长条件 ②在液体中菌体、营养物、产物易于扩散，便于控制 ③液体输送方便，易于机械化操作 ④占地面积小，生产效率高，易进行自动化控制 ⑤产品易于提取和精制等;③固定化微生物细胞发???和固定化微生物原生质体发酵 前者是20世纪70年代后期，在固定化酶的基础上发展起来的发酵技术。是固定在水不溶性的载体上，在一定的空间范围内进行生命活动的细胞。 后者是20世纪80年代中期发展起来的技术。是固定在载体上，在一定的空间范围内进行生命活动的原生质体。;固定化酶的优缺点;固定化原生质体的优点;第一节 酶生物合成的基本理论 ; 一、酶的生物合成 ;（一）RNA的生物合成--转录(transcription);转录模板;;RNA的转录过程(三步); ;RNA合成过程;RNA链的延伸图解;启动子：在DNA分子上，RNA聚合酶识别和结合的 核苷酸序列，即转录作用起始的部位。 终止子：DNA上的一段核苷酸序列，给RNA聚合酶 提供终止转录的信号，也称终止序列。 操纵子：转录的功能单位。 （调控系统和结构基因的综合）。;;原核生物的基因组成;;;真核生物基因组成;;（3）转录终止子： 对真核生物转录的终止子信号和终止过程了解甚少。但在高等真核生物的细胞中，mRNA在靠近3′端区有一段非常保守的序列 AAUAAA，这一序列为链的切断和poly(A)化提供了某些终止信号。; 定义 以mRNA为模板，以氨基酸为底物，在核糖体上通过各种tRNA、酶和辅助因子的作用，合成多肽链的过程。;;;;核蛋白体的组成; 小亚基貌似一个动物胚胎，由头部、基部和平台组成，平台与头部之间有一个裂隙；大亚基很像一个沙发，有一个柄、一个中央凸出部和一个脊； 二者组装成核糖体时，小亚基头部与大亚基凸出部之间形成一个隧道，在蛋白质合成中mRNA很可能从这里通过。; 蛋白质的合成过程 （大肠杆菌）;氨基酸的活化与转运;在核糖体上合成多肽（三阶段）;肽链合成的起始阶段;;肽链合成的延伸阶段;;肽链合成的终止阶段;;二、酶生物合成的调节 ; 操纵子——基因表达的协同单位;　;基因操纵子调节系统示意图;;操纵基因（Operater gene）: 位于启动基因和结构基因之间的一段碱基顺序，能特异性地与调节基因产生的变构蛋白结合，操纵酶合成的时机与速度。 结构基因（Structural gene）: 决定某一多肽的DNA模板，与酶有各自的对应关系，其中的遗传信息可转录为mRNA，再翻译为蛋白质。;(二) 酶合成调节的类型 1.诱导 (induction) 组成酶：细胞固有的酶类。 诱导酶：是细胞为适应外来底物或其结构类似