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- 2021-02-04 发布于广东
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实验五 血清总胆固醇测定;【实验目的】
学习血清总胆固醇测定的实验原理。
掌握总胆固醇的测定方法和操作技术。 ;【实验原理】
血清脂类包括甘油三酯、胆固醇、胆固醇酯、磷脂、糖脂、游离脂肪酸。它们在血液中以脂蛋白(脂和载脂蛋白的复合体)的形式存在。用超速离心技术可把血浆脂蛋白分成四大族:CM、VLDL、LDL、HDL,用电泳技术可把血浆脂蛋白分成α-脂蛋白、前β-脂蛋白、β-脂蛋白、CM。
;
血清中总胆固醇(TC)包括游离胆固醇FC和胆固醇酯(CE)两部分。胆固醇酯可被胆固醇酯酶水解为游离胆固醇和游离脂肪酸(FFA),胆固醇在胆固醇氧化酶的氧化作用下生成Δ4-胆甾烯酮和过氧化氢,H2O2在4-氨基安替比林和酚存在时,经过氧化物酶催化,反应生成苯醌亚胺非那腙的红色醌类化合物,其颜色深浅与标本中TC含量成正比。;【试剂与器材】
1.总胆固醇测定试剂盒
2.酶标板、板条、微量进样器、微量移液器
3.生化培养箱、酶标仪
4. 血清
;【操作步骤】
配制工作试剂:
R1取4.5ml,R2取0.5ml,置于10ml玻璃试管中
取酶标板1块,板条1条,按下表操作:
3.置于37℃生化培养箱10min,492nm波长处在酶标仪上读取各管的吸光度A。;结果与计算;【参考值 】:
胆固醇:
血清参考值:3~5.20mmo1/L;
危险阈值:5.20~
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