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? 核酸;2、核酸的性质;PART.01;1、两性电解质,一般呈酸性,在中性溶液中带负电荷。2、溶解性:微溶于水,不溶于一般有机试剂(乙醇沉淀核酸),钠盐易溶于水。;3、线性大分子,粘度高, 抗剪切力差,一般DNA比RNA粘度高。4、水解性:可被酸、碱或酶水解,DNA比RNA对稀碱稳定。
;5、颜色反应:1)核糖与浓盐酸和苔酚蓝共热呈绿色,在?670nm处可测RNA;D-核糖+浓盐酸+苔黑酚→绿色;2)2-脱氧核糖与酸和二苯胺共热呈蓝紫色,在595nm处可测DNA。D-2-脱氧核糖+酸+二苯胺→蓝紫色这二种反应可作定性试验,定量试验灵敏度低、准确性差,但快、简便。;PART.02;碱基具共轭双键强烈吸收260-290nm波段紫外光,最大吸收峰在260nm附近。这个性质有以下几个应用:;1、不同核苷酸有不同吸收特性,可用紫外分光光度计进行定性、定量测定。1OD相当于:50μg/ml DNA? ? ? ? ? ? ? 40μg/ml? RNA? ? ? ? ? ? ? 20μg/ml? 核苷酸;2、确定所提取的核酸是否纯品。
?OD260/280比值指260nm和280nm下吸光光度比值。OD是optical density(光密度)的缩写,表示被检测物吸收掉的光密度。一般来说OD260代表核酸的吸光度,OD280代表蛋白质的吸光度。;(1)DNA:? ?OD260/OD290≈1.8,纯品 ;>1.8,RNA 污染;<1.8,蛋白质污染。?(2)RNA:OD260/OD290≈2.0?,纯品。;3、紫外可使相邻T T间形成共价结合的胸腺嘧啶二聚体,引起基因突变。;本节课到此结束,谢谢大家
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