流式细胞仪讲义2.pptVIP

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流式细胞术实验结果的质控;获得流式细胞术实验结果 必须经历以一下步骤:;影响流式细胞术实验结果的主要因数:;1、流式细胞仪需要质控的部件 a、激发光路:(激光器、棱镜、透镜) b、发射光路:(透镜组合滤片) c、电子线路:(光检测器、高压供给器、放大器、 补偿线路、模数转换器 ) d、流路系统:(流动室、样品流、进样针、鞘液流) ;PMT;流式细胞仪的液流系统;2、控制流式细胞仪可变性的具体步骤: A、校正激发、发射光路 B、监控检测器的灵敏度(cv) C、监控仪器电子线路的稳定性;二、标本的可变性;1、标本的采集和固定方法的质控;2、单细胞悬液制备的质控;三、操作(试剂方法)过程的可变性;四、数据分析的可变性;实验条件对流式细胞术分析结果的影响;1、低渗处理;;2、未固定细胞样品染色后存放时间 ;3、设门 A、设一个门分析多种参数;右限:CD(16+56)+细胞(少);B、设多个门分析某一种参数;;荧光标记:FL1:CD71.177;B、设联动门分析某些参数;4、二联体细胞对DNA含量分析的影响;;;鉴别DNA直方图中凋亡细胞 与DNA异倍体G0/1期细胞峰;;;在DNA直方图中鉴别细胞增殖(SPF)与DNA 异倍体G0/1细胞峰;;在DNA直方图上细胞凋亡 和细胞坏死比较分析;;;谢谢!!

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