分子荧光光度法测定二氯荧光素.pdf

分子荧光光度法测定二氯荧光素 实验实验中修改部分 一、实验目的 ：1、（书） 2、掌握荧光分光光度计的结构及基本使用方法 3、熟悉荧光分光光度计的应用 二、方法原理： （书） 三、仪器和试剂 ： 仪器： Cary/Eclipse 荧光分光光度计。该仪器使用氙弧灯作为激发光源。在 190~900nm 的连续光谱区内进行工作。具备先进的结构性能和高效的工作效能。 仪器包括激发单色器和发射单色器、氙光源； 固定宽度范围的可调狭缝、 可调光 栅；以及两个光电备增管作为检测器。 一次实验可设置测试多种样品， 并对同一 种样品作多次测试， 实验过程均通过联机电脑的工作站进行数字化控制， 精度高、 重复性好！在环境条件允许的情况下，该仪器还可用于生物 — 化学发光的检测、 磷光的检测。 试剂： （书） 四、实验步骤： 1、配制标准溶液（按书中要求配制） 2、接通电源，打开联机电脑，开启仪器开关。 3、待仪器稳定后，进行参数设置。 （1） 选择荧光的检测模式 （2 ） 设置激发波长 500nm 发射波长 520nm （3 ） 设置激发狭缝宽 5nm 发射狭缝宽 5nm （4 ） 设置激发光栅状态 open （5 ） 设置待测溶液的单位 （6 ） 设置待测标准样品个数 5 （7 ） 设置重复检测样品次数 1 （8 ） 设置最小 R2 0.95 （9 ） 设置待测样的个数及其重复检测次数 1 （10）设置报告模式 （11）设置自动存贮模式为自动存贮 off 4 、测定标准溶液和待测样溶液的荧光强度 5、测定过程应将挡板关闭 五、结果处理 按原要求处理 六、思考题： 1、试说明分子荧光法的基本原理及影响因素。 2、绘出荧光光度计的简易光路图。