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分子标记的实验原理及操作流程
标记原理
技术的全称是随机扩增多态性（），此技术建立于基础之上，使用一系列 具有个左右碱基的单链随机引物， 对基因组的全部进行扩增，以检测多态性。由 于整个基因组存在众多反向重复序列，因此须对每一随机引物单独进行，单一引 物与反向重复序列结合，使重复序列之间的区域得以扩增。引物结合位点序列的 改变以及两扩增位点之间碱基的缺失、插入或置换均可导致扩增片段数目和长度 的差异，经琼脂糖凝胶电泳分离后通过染色以检测片段的多态性。
一、 实验材料
不同来源的（）。
二、 实验设备
仪，管或硅化的 管，电泳装置，凝胶成像仪。
三、 试剂
、引物：购买成品引物序列合成。
、酶
、缓冲液
、:。
、:。
四、 操作步骤：
.在反应体系中，加入
模板（）
引物（约）
酶单位（）
加至
混匀稍离心，加一滴（约）矿物油。
.在仪中预变性c 分钟,然后循环：°C分钟，°C分钟，°C分钟，共轮循环。
.循环结束后,c分钟，C保存。
.在产物中加上样缓冲液（）于琼脂糖胶上电泳，稳压V。
.电泳结束，溴化乙锭染色分钟。
.用凝胶成像仪观察、拍照。
注：样品可以采用新鲜样品，硅胶干燥样品，标本等
提取可采用或法
质量检测可用紫外分光光度计法和电泳法
操作流程简图：
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