092406123李文宣RN A 病毒反向遗传.pptVIP

RN A 病毒反向遗传 1. RN A 病毒反向遗传的应用前景 2. R N A 病毒反向遗传学的研究方法和应用 3. 负 股 RNA 病毒反 向遗传 学操 作及其 应 用 RN A 病毒反向遗传的应用前景 ? 反向遗传学 ( r e v e r s e g e n e t i c s ) 是相对于正 向 ( 经典 ) 遗传学而提出的。反向遗传学则是在已 知基 因序列的基础上， 利用现代生物理论与技术， 通过核 苷酸序列的突变、 缺失、 插入等手段创造突 变体并研 究突变所造成的表型效应。即反向遗传 学是直接从生 物的遗传物质入手来研究基因的生 物学功能， 阐述生 物生命发生的本质现象与规律， 如生物的繁殖复制机 制、 病毒的致病机制等。 反向 遗传操作技术是通过构 建 R N A 病毒的感染性分子 克隆在 D N A 分子水平上对 其进行体外操作。从而 研究病毒结构与功能的方法。 感染性分子克隆包 括感染性 c D N A 和感染性体外转录 本。 构建感染性 c D N A 就是通过反转录一聚合酶链反 应 ( R T — P C R ) 扩增 R N A 病毒基因组的 c D N A 片 段， 然后利用其限 制性酶切位点， 将 c D N A 片段顺 次相连并克隆于合 适的载体。 获得基因组全长 cDNA 克隆， 以其转染 适当细胞， 全长 cDNA 在细胞