2015版计数培养基适用性检查-记录.docxVIP

计数用培养基适用性检查记录 培养基名称 生产厂家 规格 批号 胰酪大豆胨琼脂培养基 沙氏葡萄糖琼脂培养基 玫瑰红钠琼脂培养基 R2A琼脂培养基 胰酪大豆胨琼脂对照培养基 沙氏葡萄糖琼脂对照培养基 玫瑰红钠琼脂对照培养基 R2A琼脂对照培养基 检查方法：《中国药典2015版》四部非无菌药品微生物限度检查法：微生 物计数法（通则1105）。 验证用仪器型号及编号： 立式蒸汽灭菌锅： 型号 编号： 生化培养箱 型号 编号： 霉菌培养箱：型号 编号： 菌液制备：验证用菌种第（）代 接种金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、枯草芽抱杆菌的新鲜培养物至胰酪大豆 胨液体培养基上，于30?35C培养18?24h;上述培养物用PH7.0氯化钠蛋白胨缓 冲液10倍递增稀释至1ml含菌数为50?100cfu的菌悬液备用。 接种白色念珠菌的新鲜培养物至沙氏葡萄糖液体培养基上， 于20?25C培养2? 3天;上述培养物用PH7.0氯化钠蛋白胨缓冲液10倍递增稀释至1ml含菌数为50? 100cfu的菌悬液备用。 将黑曲霉菌菌悬液用PH7.0氯化钠蛋白胨缓冲液10倍递增稀释至1ml含菌数为 50?100cfu的菌悬液备用。 培养基配制 按相应培养基产品说明分别配制胰酪大豆胨琼脂培养基、沙氏葡萄糖琼脂培养 基、玫瑰红钠琼脂培养基、R2A琼脂培养基、胰酪大豆胨琼脂对照培养基、沙氏 葡萄糖琼脂对照培养基、玫瑰红钠琼脂对照培养基、 R2A琼脂对照培养基，并按 照相应的灭菌方式灭菌备用。 5、培养基计数适用性检查 5.1胰酪大豆胨琼脂培养基适用性检查 分别接种不大于100cfu的金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、枯草芽抱杆菌、 白色念珠菌、黑曲霉菌的菌悬液置直径90mm的无菌平皿中各2皿，另一个皿不接 种菌作为空白对照。倾注20ml温度不超过45C熔化的胰酪大豆胨琼脂对照培养基， 混匀，凝固。将接种金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、枯草芽抱杆菌的平皿倒置于 30-35E的生化培养箱培养不超过 3天，计数；将接种白色念珠菌、黑曲霉菌的平 皿倒置于30-35r的生化培养箱培养不超过 5天，计数。被检培养基同法操作。结 果见表1。 表1 培养基适用性检查结果 菌种类型 被检培养基(cfu) 对照培养基(cfu) A/B (%) 被检培养基与对 照培养基上的菌落 形态与大小对比 皿1 皿2 平均A 皿1 皿2 平均B 金黄色 葡萄球菌 枯草芽 抱杆菌 铜绿假单 胞菌 白色念珠 菌 黑曲霉菌 5.1.1检验标准：被检培养基的菌落数与对照培养基的菌落数比较，比值在 0.5-2.0之间，且菌落形态大小与对照培养基上的菌落一致。 判该培养基的适用性检 查符合规定。 5.1.2结果判定： 结论： 5.2沙氏葡萄糖琼脂培养基适用性检查 分别接种不大于100cfu的白色念珠菌、黑曲霉菌的菌悬液置直径 90mm的无 菌平皿中各2皿，另一个皿不接种菌作为空白对照。倾注 20ml温度不超过45C熔 化的沙氏葡萄糖对照琼脂培养基，混匀，凝固。将平皿倒置于 20-25C的霉菌培养 箱培养不超过5天，计数。被检培养基同法操作。结果见表 2。 表2 培养基适用性检查结果 菌种类型 样品培养基 对照培养基 A/B (%) 被检培养基的菌 洛与对照培养基上 的菌落形态、大小 对比 皿1 皿2 平均A 皿1 皿2 平均B 白色念珠菌 黑曲霉 5.2.1检验标准：被检培养基的菌落数与对照培养基的菌落数比较，比值在 0.5-2.0 之间，且菌落形态大小与对照培养基上的菌落一致。判该培养基的适用性检查符合规定。 5.2.2结果判定： 结论： 5.3玫瑰红钠琼脂培养基适用性检查。 分别接种不大于100cfu的白色念珠菌、黑曲霉菌的菌悬液置直径 90mm的无 菌平皿中各2皿，另一个皿不接种菌作为空白对照。倾注 20ml温度不超过45C熔 化的玫瑰红钠对照琼脂培养基，混匀，凝固。将平皿倒置于 20-25 E的霉菌培养箱 培养不超过5天，计数。被检培养基同法操作。 结果见表3 表3 培养基适用性检查结果 菌种类型 样品培养基 对照培养基 A/B (%) 被检培养基的菌 洛与对照培养基上 的菌落形态、大小 对比 皿1 皿2 平均A 皿1 皿2 平均B 白色念珠菌 黑曲霉 5.3.1检验标准：被检培养基的菌落数与对照培养基的菌落数比较，比值在 0.5-2.0 之间，且菌落形态大小与对照培养基上的菌落一致。判该培养基的适用性检查符合规定。 5.3.2结果判定： 结论： 5.4 R2A琼脂培养基适用性检查 分别接种不大于100cfu的铜绿假单胞菌、枯草芽抱杆菌的菌悬液置直径90mm 的无菌平皿中各2皿，另一个皿不接种菌作为空白对照。倾注20ml温度不超过45C 熔化的R2A琼脂对照培养基，混匀，凝固。将平