遗传的物质基础-dna.pptVIP

六、 DNA 的变性和复性 变性 ：热，试剂，氢键、碱基堆积力破坏， DNA 由双链变成单链 温度： 80 ～ 100 ℃ 变性剂：尿素，甲酰胺 增色效应 （ hyperchromicity ） 正常双链（ 50 μ g/ml ） A 260 =1.00 完全变性的单链 DNA A 260 =1.37 单核苷酸 A 260 =1.60 DNA 双螺旋结构失去一半时， A 260 =1.185 Tm 值的影响因素 ： DNA 的均一性 均一性高， Tm 值的范围小 G-C 含量 G-C 含量高， Tm 值高 经验公式 G-C%=(Tm-69.3) × 2.44 介质中的离子强度 低离子强度易熔解变性 DNA 保存在高浓度缓冲液中防变性（ TE ） 复性 单链重新缔合为双螺旋的过程，一般比 Tm 低 20 ～ 25 ℃下进行复性 过程：复性时溶液中单链 DNA 随机碰撞。 GC 先配对形成短的双链，然后配对区域延伸，象 拉链一样 复性产生的不一定是原有的互