2021血栓与止血检测进展.ppt

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63 4 、 rF Ⅶ a 制品:在 Fg > 1.0 1.0g/L , BPC > 50 × 10 9 /L 和 APTT/PT 接近正常情况下,其 疗效最佳。可以选用 TEG/ROTEM 检查中 的 R/CT 、 K/CFT 缩短以及 MA/MCF 升高最 能反映 rF Ⅶ a 的效果,但 APTT/PT 的缩短不 能反映 rF Ⅶ a 的效果。 64 (十三)血小板功能分析仪 ( platelet function analyzer- 100,PFA-100) 体外筛选血小板黏附和聚集的 仪器。以标有胶原 / 腺上腺素 ( CEPI )和胶原 /ADP ( CADP ) 两种纤维膜为诱导剂,以观察 膜孔闭合时间( closure time , CT )为结果。 ? 参考范围 CEPI 为 61 ~ 203s ; CADP : 48 ~ 187s 31 〔检测方法〕在待测血浆中加入蛇毒温 育,蛇毒可直接激活 PC ,使 PC 转化为 AP- C 。随后在检测系统中加入 APTT 试剂以检 测依赖 PC 活性的血浆凝固时间( Protein C Activ-Ity Dependent ClottingTime,PCAT ) 若待测血浆中的 PC 系统正常,则加入 Ca 2+ 后血浆凝固时间显著延长。为了避免诸多 因素的影响,本试验设计了对照组,即在 实验过程中以缓冲液代替 PC 激活剂,血浆 不依赖 PC 活性的血浆凝固时( PCAT/O ) ,其结果应短于 60s 。 32 〔参考值〕 PCAT 为 85 ~ 200s , PCAT/O 为 33 ~ 55s ( n ﹦ 234 )。 〔临床意义〕本试验对 PC 活性低于参考值 70 %的检出率为 90 %;对 PS 活性低于参考值的 60 % 的检出率为 89 %;对凝血因子 Ⅴ Leiden 突变的检 出率为 100 %;对凝血酶原( F Ⅱ ) 20210 C→A 突变的检出率为 84 %。本试验的检出特异性为 79 %。因此,本试验多用于 PC 、 PS 、 F Ⅴ Leiden 突 变和 F Ⅱ 20210 C→A 突变的检测,起到蛋白 C 系 统筛选检测作用。但是,本试验也有假阳性,见 于凝血因子 Ⅴ 、 Ⅷ 活性升高、口服抗凝剂和狼疮 抗凝物质等。 33 (八)蛋白 Z 抗原检测 蛋白 Z ( Protein Z,PZ )是二十世纪 90 年代发现的一种血液凝固调节蛋白,为一 种维生素 K 依赖的单链糖蛋白,由肝脏合成 后分泌入血。人 PZ 的相对分子量为 62KD , 半寿期为 2.5 天,其基因位于 13q34 。在 Ca 2+ 和磷脂存在时, PZ 可与蛋白 Z 依赖的蛋 白酶抑制物( Protein Z-Pependent ProtaseInhibItor,ZPI )结合,并进一步与 F Ⅹ a 形成 Ⅹ a-ZPI-PZ 复合物而使因子 Ⅹ a 在 一分钟内便失去 95 %以上的凝血活性。 34 〔检测方法〕 目前多采用法国 Stago 公 司的 ELISA 试剂盒检测。 〔参考值〕法国学者报道 1.04 ~ 3.57 mg/L ;国内潘学谊报道 60 例中青年人 ( 2258 ± 480 )μg/L。妊娠期时 PZ 水平逐 渐增高。 35 〔临床意义〕目前 PZ 在临床上的意义尚不十 分清楚。 Wasse 等研究发现 PZ 缺乏(< 1.0 Mg/L ) 在缺血性脑卒中和健康对照中分别为 20 %和 5 %, 二者具有显著性差异, PZ 缺乏可使缺血性脑卒中 的危险性提高 4 倍。 Soft 等报道在急性冠脉综合征 病人当中 PZ 水平明显低于健康对照,说明 PZ 缺乏 是导致急性冠脉综合征的独立的危险因素。此外, 尚有报道认为 PZ 缺乏也会导致临床出血症状,故 认为 PZ 具有血栓和出血双种作用,机制未明。此 外,血透患者和口服避孕药者 PZ 水平升高;口服 抗凝剂、流产、早产、先兆子痫、胎儿宫内发育 迟缓等 PZ 血浆水平降低。 36 蛋白 Z 依赖的蛋白酶抑制物检测 (proteinZ-dependent protease inhibitor,ZPI) 〔原理〕用抗 ZPI 的多克隆抗体色被酶标板, 待测血浆中的 ZPI 与固相抗体结合,生物素 化抗 ZPI 单抗与 ZPI 抗原结合形成固相多抗 - 抗原 - 生物素单抗夹心物。后加入链霉素亲 和素 - 辣根过氧化物酶复合物,其中辣根过 氧化物酶作用其特异性底物甲基联苯胺 ( TMB )生成有色物质,显色程度与 ZPI 含量 呈正比。 37 〔参考范围〕各室需自行建立 〔临床意义〕 ZPI 应与 PZ 同时检测。 PZ 缺乏 时,势必使 ZPI 抑制 FXa 和 FXIa 的

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