模板青霉素生产工艺.pptVIP

5、聚合反应 氨苄青霉素在水溶液中易形成聚合物，是氨苄青霉素过敏反应的主要过敏原之一。 .精品课件. * 6、过敏反应 可能为青霉噻唑多肽和青霉噻唑蛋白 .精品课件. * （B）、制备工艺 1、菌种 最早的原始菌种是点青霉菌(Penicillium notatum)； 现用产黄青霉菌(Pen.chrysogenum) 按菌丝的形态分为丝状菌（黄孢子和绿孢子）和球状菌（绿孢子和白孢子）两种。 国内青霉素生产厂大都采用绿色丝状菌，有的厂家用白孢子球状菌。 .精品课件. * 2、发酵工艺流程 1）丝状菌发酵工艺流程 大米茄子瓶 .精品课件. * 2）球状菌培养工艺流程 球状菌菌种 亲米孢子 生产米孢子 种子液 发酵液 （亲米孢子培养） 亲米锥形瓶 25度，6-8d 冷冻管 （生产米孢子培养） 大米茄子瓶 25度，8-10d 种子罐培养 种子罐 28度，50-60h，1.5v/(v*min) 发酵罐培养 发酵罐 26度，PH6.7-7.0，6-7d，0.8-1.0v/(v*min) .精品课件. * 3、发酵工艺要点 1）丝状菌：种子：砂土孢子接入斜面上，25℃培养6～7天，制成悬液，接入大米茄子瓶内，经25℃培养6～7天，制成大米孢子，真空干燥。 生产时按接种量移入种子罐（葡萄糖、玉米浆、尿素），25℃培养40～45小时，菌丝浓度达40%以上，按10%-15%接种量移入繁殖罐（花生饼粉、葡萄糖）内。 经25℃培养13～15小时，菌丝体积40%以上，残糖在1.0%左右，无菌检查合格便可作为种子，按30%接种量移入发酵罐。 .精品课件. * 2）球状菌：首先由冷冻管孢子接入混合有0.5-1.0%玉米浆的摇瓶培养原始亲米孢子，再接入大米茄子瓶生产大米孢子，两者都是在25度下静置培养10天可收获。保存在5度冰箱。种子培养：冷藏10天以内的生产米，接入种子罐（花生饼粉、玉米胚芽粉、葡萄糖、饴糖）28度培养50-60h，当PH降为5.5-5.0，菌丝呈菊花团状，平均直径在100-130微米，每毫升球菌数6万-8万只，沉降率在85%以上，可用。接入发酵罐。 .精品课件. * 培养基 碳源： 提供能量 如乳糖、蔗糖、葡萄糖、淀粉、天然油脂等。乳糖能被产生菌缓慢利用而维持青霉素分泌的有利条件，故为最佳碳源，但价格高，普遍使用有困难。天然油脂如玉米油、豆油也能被缓慢利用作为有效的碳源，但不可能大规模使用。目前生产上用的碳源是葡萄糖母液和工业用葡萄糖。 丝状菌补糖一般在残糖降至0.6%左右、PH上升后开始加，0.07-0.15%/次，次/h;球状菌在PH高于6.5时开始加糖。 .精品课件. * 氮源： 提供蛋白合成原料 玉米浆。现因国内玉米浆产量少，经调整配方以花生饼粉代替，生产水平也可达到技术指标。目前生产上用的氮源是花生饼粉、麸质粉玉米胚芽粉及尿素等。 .精品课件. * 前体 作为苄青霉素生物合成的前体有苯乙酸、苯乙酰胺等。它们一部分能直接结合到青霉素分子中。这些前体对青霉菌都有一定的毒性，加入量不能大于0.1%。加入硫代硫酸钠能减少它们的毒性。 .精品课件. * 无机盐 ①硫和磷:硫浓度降低时青霉素产量减少3倍，磷浓度降低时青霉素产量减少1倍。 ②钙、镁和钾： 青霉素的生物合成中合适的阳离子比例以钾30%、钙20%、镁41%为宜。如镁离子少，钾离子多时，菌丝细胞将培养基中氮源转化成各种氨基酸的能力强。钙离子影响细胞的生长和培养基的pH 。 ③铁离子：铁易渗入菌丝内，它对青霉素发酵有毒害作用。发酵液中铁含量6微克/毫升时无影响；60微克/毫升时降低产量30%；300微克/毫升时降低产量90%。要低于30微克/ml .精品课件. * 培养条件控制 产黄青霉菌分三个不同代谢时期。 ①菌丝生长繁殖期:发芽、菌丝增殖、形成脂粒、积累藏物。 ②青霉素分泌期: 菌丝生长趋势减弱，间隙添加葡萄糖作碳源和间隙加入花生饼粉、尿素作氮源，并间隙加入前体，此期间球状菌pH要求6.6～6.9，丝状菌pH要求6.2～6.4， 青霉素分泌旺盛。 ③菌丝自溶期: .精品课件. * 控制要点： 1）加糖控制：一般残糖降至0.6%左右、pH上升后可开始加糖。 2）补料及添加前体：丝状菌发酵于接种后8～12小时，发酵液中残余苯乙酰胺浓度为0.05～