生化分离与纯化技术 青霉素的萃取与萃取率的计算 青霉素的萃取与萃取率的计算.pptVIP

LOGO 青霉素的萃取与萃取率的计算 离子交换色谱分离氨基酸 产品简介 1 实训目标 2 实训原理 3 实训试剂与设备 4 生产实训 5 产品简介 1、青霉素简介 青霉素（Benzylpenicillin / Penicillin）又被称为青霉素G、peillin G、 盘尼西林、配尼西林、青霉素钠、苄青霉素钠、青霉素钾、苄青霉素钾。青霉素是抗菌素的一种，是指从青霉菌培养液中提制的分子中含有青霉烷、能破坏细菌的细胞壁并在细菌细胞的繁殖期起杀菌作用的一类抗生素，是第一种能够治疗人类疾病的抗生素。青霉素类抗生素是β-内酰胺类中一大类抗生素的总称。 2、产品结构式： 离子交换色谱分离氨基酸 产品简介 3、产品分子式：C16H18N2O4S·HCl 4、化学名为1-乙氧甲酰乙氧6-〔D（-）-2-氨基-2-乙酰氨基〕青霉烷酸盐酸盐 5、青霉素药理作用 干扰细菌细胞壁的合成。青霉素的结构与细胞壁的成分粘肽结构中的D-丙氨酰-D-丙氨酸近似，可与后者竞争转肽酶，阻碍粘肽的形成，造成细胞壁的缺损，使细菌失去细胞壁的渗透屏障，对细菌起到杀灭作用。 对革兰阳性球菌及革兰阳性杆菌、螺旋体、梭状芽孢杆菌、放线菌以及部分拟杆菌有抗菌作用。 离子交换色谱分离氨基酸 实训目标 1.学会利用溶剂萃取的方法对目的产物进行提纯。 2.掌握利用碘量法测定青霉素的含量，并计算出青霉素的萃取率。 离子交换色谱分离氨基酸 实训原理 萃取过程是利用混合物质在两个不相混溶的液相中各种组分的溶解度的不同，从而达到分离的目的。pH为2.3时，青霉素在乙酸乙酯中比在水中溶解度大，因而可以将乙酸乙酯加到青霉素混合液中，并使其充分接触，从而使青霉素被萃取浓集到乙酸乙酯中，达到分离提存的目的。 离子交换色谱分离氨基酸 实训试剂与设备 一、试剂和材料 1、Na2S2O3（0.1mol/L） 2、碘溶液（0.1mol/L） 3、HAc-NaAc（pH4.5）缓冲液 4、NaOH液（1mol/L）、HCl液（1mol/L）、淀粉指示剂、乙酸乙酯、稀H2SO4、蒸馏水。 5）Dowex50 离子交换色谱分离氨基酸 实训试剂与设备 二、实验器材 分液漏斗，小烧杯，电子天平，酸式滴定管，移液管，容量瓶，量筒，玻璃棒，pH试纸。 离子交换色谱分离氨基酸 生产实训 一、生产前准备 1、检查生产原料、各种生产用试剂；2、检查生产设备；3、检查生产记录等文件 二、生产操作 （一）生产前准备 1、Na2S2O3（0.1mol/L）配制： 取Na2S2O3约2.6g与无水Na2CO30.02g，加新煮沸过的冷蒸馏水适量溶解，定容到100mL。 2、碘溶液（0.1mol/L）配制： 取碘1.3g，加KI3.6g与水5mL使之溶解，再加HCl1～2滴，定容到100mL。 3、HAc-NaAc（pH4.5）缓冲液配制 取83g无水NaAc溶于水，加入60mL冰醋酸，定容到1L。 离子交换色谱分离氨基酸 生产实训 4、Dowex50的处理： Dowex50用蒸馏水充分浸泡后，用6mol/LHCl浸泡煮沸1h，然后用蒸馏水洗去HCl至树脂呈中性，换15%NaOH浸泡1h，用蒸馏水洗去NaOH至树脂呈中性，最后用pH4.2柠檬酸钠缓冲液浸泡备用。 5、Na2S2O3的标定： 取K2Cr2O30.15g于碘量瓶中，加入50mL水，使之溶解，再加KI2g，溶解后加入稀H2SO440mL，摇匀，密闭，在暗处放置10min，取出后再加水250mL稀释，用Na2S2O3滴定临近终点时，加淀粉指示剂3mL，继续滴定至蓝色消失，记录Na2S2O3消耗的体积。。 离子交换色谱分离氨基酸 生产实训 二、青霉素的萃取 1、用电子天平称取0.12g青霉素钠，溶解后定容到100mL。 2、取15mL乙酸乙酯液，用稀H2SO4调节pH在2.3～2.4之间，准确移取10mL青霉素钠溶液与乙酸乙酯溶液融合，置于分液漏斗中，摇匀，静置30min。 3、溶液分层后，讲下层萃余相置于烧杯中备用，将上层萃取液回收。 离子交换色谱分离氨基酸 生产实训 三、萃取率的计算 1、取5mL定容好的青霉素钠溶液于碘量瓶中，加NaOH溶液1mL，放置20min，再加1mLHCl溶液与5mLHAc-NaAc缓冲液，精密加入碘滴定液5mL，摇匀，密闭，在20～25℃暗处放置20min，用Na2S2O3滴定液滴定，临近终点时加淀粉指示剂3mL，继续滴定至蓝色消失，记录Na2S2O3消耗的体积（V对照）。 2、另取5mL定容好的青霉素钠溶液于碘量瓶中，加入5mLHAc-NaAc缓冲液，再精密加入碘滴定液5mL，用滴定液滴定至蓝色消失，记录Na2S2O3消耗的体积（V空白）。 3、取萃余项5mL于碘量瓶中，按步骤1）的方法