专题八 第1讲 基因工程和细胞工程.docxVIP

第1讲　基因工程和细胞工程 [考纲要求]　1.基因工程的诞生(Ⅰ)。2.基因工程的原理及技术(含PCR技术)(Ⅱ)。3.基因工程的应用(Ⅱ)。4.蛋白质工程(Ⅰ)。5.植物的组织培养(Ⅱ)。6.动物细胞培养与体细胞克隆(Ⅱ)。7.细胞融合与单克隆抗体(Ⅱ)。8.实验：DNA的粗提取与鉴定。 考点一　基因工程 1．基因工程中的4个“3” (1)基因工程的3种基本工具 ①限制性核酸内切酶：识别特定核苷酸序列，并在特定位点上切割DNA分子。 ②DNA连接酶：a.E·coliDNA连接酶只能连接黏性末端；b.T4DNA连接酶能连接黏性末端和平末端。 ③载体：需具备的条件包括： a．能在宿主细胞内稳定存在并大量复制。 b．有一个至多个限制酶切割位点。 c．具有特殊的标记基因，以便对含目的基因的受体细胞进行筛选。 (2)获取目的基因的3条途径 ①从基因文库中获取；②利用PCR技术扩增；③用化学方法直接人工合成。 (3)将目的基因导入受体细胞的3种类型 ①植物：体细胞或受精卵——常用农杆菌转化法(双子叶植物和裸子植物)、花粉管通道法、基因枪法(单子叶植物)。 ②动物：受精卵——显微注射技术。 ③微生物：细菌(常用大肠杆菌)——感受态细胞法(钙离子处理法)。 (4)目的基因分子水平检测的3个层次 ①检测目的基因是否插入到转基因生物的DNA上：DNA分子杂交技术。 ②检测目的基因是否转录出了mRN