辽东楤木叶总皂苷抗人乳腺癌作用及其毒性研究.docxVIP

辽东楤木叶总皂苷抗人乳腺癌作用及其毒性研究 目的：通过对辽东楹木叶总皂苷的药效学和毒理学研究 , 探讨其体内外抗肿 瘤作用、作用机制及其药物安全性。 方法： ①通过 MTT法检测总皂苷体外对人乳 腺癌 MCF-7细胞增殖的影响； Hoechst 33258 染色和 Annexin V-FITC ／PI 双染 法检测总皂苷对 MCF-7细胞凋亡及对细胞形态的影响； Fluo.3 AM染色法检测总 皂苷对细胞内钙离子分布变化的影响；免疫印迹法检测总皂苷对 active caspase-9, active caspase-3, Bax, cleaved PARP, Pro-caspase-9, Pro-caspase-3,Bcl-2,PARP, ERK1/2,P-ERK1/2,P38,P-P38,JNK, P-JNK, Grp78/Bip, PERK, ATF-6 α, IRE1 α, Pro-caspase-4, PERK, P-PERK, eIF2 α, P-eIF2 α , ATF-4 and Chop 蛋白表达的影响；免疫印迹法检测 P 38,JNK,ERK 抑 制剂预先作用后 , 总皂苷对相应蛋白表达的影响： 建立裸鼠乳腺癌模型 , 检测总皂 苷的体内抗肿瘤作用及对免疫器官的影响； Tunel 染色法检测各给药组瘤组织中 细胞凋亡情况；免疫组织化学染色法检测各给药组瘤组织