毛百合组织培养与试管鳞茎膨大的研究.docxVIP

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毛百合组织培养与试管鳞茎膨大的研究 本试验以毛百合鳞片、无菌苗叶片为外植体 , 建立高效组织培养再生体系 , 为毛百合的育种、 遗传转化、园林应用及生产等奠定理论基础。 探讨了不同浓度 的活性炭 (AC)、蔗糖、大量元素、 NAA、IBA、多效唑 (PP333) 、水杨酸 (SA) 、以 及培养基状态对鳞茎形成及膨大的影响 , 以期为毛百合引种驯化及试管微鳞茎的 工厂化生产提供理论依据及关键技术。 以毛百合鳞片为外植体建立了组培快繁再生体系试验发现消毒处理采用 75%酒精和 2%次氯酸钠灭菌 12min 最佳;中层鳞片为组织培养的最佳外植体 , 鳞 片不同部位的诱导及分化能力由强到弱依次基部、中部、顶部;单因子试验表 明 ,6-BA 与不定芽诱导和愈伤的形成有直接关系 , 鳞片诱导不定芽的最佳培养基 MS+6-BA2.0mg/L分化率 86.7%, 分化系数 4.70 ;愈伤诱导及分化最佳培养基 MS+6-BA (1.0-2.0mg/L), 诱导率 83.3%, 分化系数 6.25 ;2,4-D( 小于 2.0mmg/L) 促进愈伤的形成及分化 , 但对不定芽的分化无影响: 双因子试验表明 , 愈伤诱导及 分化的最佳培养基是 MS+6-BA0.5mg/L+2,4-D1.0mg/L; 诱导率 90%,分化系数 7.44 ; 诱导不定芽的最佳培养基 MS+6-BAO.5mg/L+NAAO.5mg/L,分化率 86.7%, 分化系数 5.69 ;不定芽增殖的最佳培养基 MS+BA1.Omg/L+NAAO.1mg/L,增殖系数 7.8 。最佳 生根培养基 MS+ACO.5mg/L,生根率 100%,移栽到珍珠岩基质中 , 成活率达 85%。 以无菌苗叶片为外植体建立再生体系试验发现叶片的诱导分化存在着显著的位置效益 , 叶片的诱导分化能力由强到弱依次是基部、中部、顶部;不定芽 诱导最佳培养基 MS+NAA0.3mg/L+6-BA2.0mg/L,分化率 86.7%, 分化系数 4.31 ;不定芽增殖最佳培养基 MS+NAA0.1mg/L+6-BA2.0mg/L,增殖系数 4.93, 生长良好;最 佳生根培养基 1/2MS+NAA1.Omg/L和 1/2MS+IBA1. Omg/L,生根率均达 100%。移栽 幼苗成活率达 82%以上。 鳞茎膨大试验研究试验发现当 AC浓度为 1.0g/L 时, 鳞茎直径增大 2.50 , 鲜重 828.2mg, 结鳞茎率 100%,新增鳞茎 4.40 个;当 NAA浓度为 1.Omg/L 时, 鳞茎直径增大 2.26 倍 , 鲜重 658.4mg, 新增鳞茎 2.60 个;当 IBA 浓度在 1.0-2.0mg/L 范围时 , 结鳞茎率均 100%,鳞茎直径均增大 2.04 倍, 当 IBA 浓度为 1.0mg/L 时, 新增鳞茎数 2.57 个, 当 IBA 浓度为 2.0mg/L 时 , 更有利于鳞茎的膨大 , 鲜重 675.8mg;2MS对鳞茎的形成和膨大的效果最好 , 鳞茎直径增大 2.37 倍, 鲜重 696.5mg, 结鳞茎率为 100%,新增鳞茎 3.60 个;当蔗糖为 90g/L 时, 鳞茎直径增大 2.05 倍, 鲜重 628.3mg, 结鳞茎率 100%,新增鳞茎 1.37 个;当 PP333浓度为 10mg/L , 鳞茎直增大 2.20 倍, 鳞茎鲜重 625.4mg, 结鳞茎率 100%。水杨酸有利于提高鳞茎的诱导率 , 但不利于鳞茎膨大 , 当水杨酸浓度为 0.5mg/L 时, 结鳞茎率 87%,新增鳞茎 4.63 个。 从鳞茎膨大效果和接种方便上考虑 , 生产上以半固培养方式为佳 , 鲜重 448.2mg, 结鳞茎率 92%,平均鳞茎 2.70 个;经膨大处理的小鳞茎无需生根即可移 栽 , 鳞茎直径大于 8mm的植株长势较好 , 移栽后易成活。

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