生物制药工程原理与设备_生物制药工程原理与设备_9.3离子交换分离技术.pptVIP

项目三 离子交换色谱分离法 任务二 离子交换树脂操作技术 一、树脂预处理 1.阳离子交换树脂的预处理 饱和氯化钠 1M氢氧化钠 1M盐酸 3BV12小时 3BV 2～ 4小时 3BV4～ 8小时 2.阴离子树脂的预处理 饱和氯化钠 1M盐酸 1M氢氧化钠 3BV12小时 3BV 2～ 4小时 3BV4～ 8小时 二、装柱 1.干法装柱 将干的离子交换树脂缓缓加入柱中，同时轻轻振动色谱柱，使离子交换树脂松紧一致，树脂高度一般约为柱内径的8～10倍。随后小心沿壁加入洗脱剂，至刚好覆盖离子交换树脂顶部平面。 2.湿法装柱 将湿离子交换树脂加入合适量洗脱剂调成稀糊状，然后徐徐灌入柱子，让离子交换树脂自然沉降。沉降后，树脂高度一般应在柱内径的8～10倍范围。 装柱后树脂层中不能存留 气泡，不能使树脂露出水面 三、上样和洗脱 1.湿法上样 把被分离的组分溶解在少量洗脱剂中，小心加在离子交换树脂顶部，注意保持离子交换树脂表面为水平面，上面的液体无湍动现象。 2.干法上样 在样平液中加入适量离子交换树脂，搅拌交换一定时间，收集树脂装入树脂柱。 3.洗脱 在树脂柱中缓缓加入洗脱剂，进行洗脱，各组分则先后被洗出。洗脱液合并后，回收溶剂，得到某单一组分。整个操作过程必须保持树脂表面的溶液无湍动现象，液面恒定，不流干。 （四）阴、阳离子交换树脂的再生 阴、阳离子树脂的再生操作过程有反冲洗、排出积水、进再生液、置换清洗、正洗等步骤。 四、混合柱的再生 混合柱的再生操作包括反洗分层、排除积液、进再生液、置换清洗、混合、正洗等操作步骤，与单柱操作不同的是增加了反洗分层和混合过程。 项目三 离子交换色谱分离法