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酶生物传感器 酶生物传感器得应用进展 摘要：酶生物传感器就是将酶作为生物敏感基元 , 通过各种物理、化学信号转换器捕捉目标物与敏感基元之间得反应所产生得与目标物 浓度成比例关系得可测信号 , 实现对目标物定量测定得分析仪器。与传统分析方法相比 , 酶生物传感器具有独特得优点 : 选择性高、 反复多次使用、响应快、体积小、可实现在线监测、成本低，便于推广普及。本文主要论述生物酶传感器得特征、 发展及酶传感器中应用得新技术。 关键词： 酶生物传感器 ;进展 ;应用新技术 概述 生物传感器 (Biosensor) 就是一类特殊得化学传感器 , 通过各种物 理、化学型信号转换器捕捉目标物与敏感基元之间得反应 , 然后将反 应得程度用离散或连续得信号表达出来 , 从而得出被测物得浓度 [1] 。自 1962 年 Clark [2] 等人提出把酶与电极结合来测定酶底物得设想后， 1967 年 Updike 与 Hicks [3] 研制出世界上第一支葡萄糖氧化酶电极 [2] ， 用于定量检测血清中葡萄糖含量、 此后，酶生物传感器引起了各领域 科学家得高度重视与广泛研究，得到了迅速发展、 酶生物传感器就是将酶作为生物敏感基元， 通过各种物理、 化学信 号转换器捕捉目标物与敏感基元之间得反应所产生得与目标物浓度 成比例关系得可测信号， 实现对目标物定量测定得分析仪器、 与传统 分析方法相比，酶生物传感辑就是由固定化得生物敏感膜与与之密切 结合得换能系统组成， 它把固化酶与电化学传感器结合在一起， 因而 酶生物传感器 具有独特得优点： (1) 它既有不溶性酶体系得优点，又具有电化学电 极得高灵敏度 ;(2) 由于酶得专属反应性， 使其具有高得选择性， 能够 直接在复杂试样中进行测定、 因此，酶生物传感器在生物传感器领域 中占有非常重要得地位、 生物传感器具有多样性、无试剂分析、操 作简便、灵敏、快速、价廉、可重复连续使用等特点 , 已在食品发酵 工业、临床医学、 环境监测、军事科学等领域展现出十分广阔得应用 前景 [4-9] 。 酶生物传感器得基本结构 酶生物传感器得基本结构单元就是由物质识别元件 ( 固定化酶膜 ) 与信号转换器 ( 基体电极 ) 组成、当酶膜上发生酶促反应时， 产生得电活性物质由基体电极对其响应、 基体电极得作用就是使化学信号转变为电信号，从而加以检测，基体电极可采用碳质电极 ( 石噩电板、玻碳电极、碳棚电极 ) 、R电极及相应得修饰电极、 酶生物传感器得分类 生物传感器按换能方式可分为电化学生物传感器与光化学生物传感器 2种。 3、1 电化学酶传感器 基于电子媒介体得葡萄糖传感器 , 具有响应速度快、灵敏度高、稳定性好、寿命长、抗干扰性能好等优点 , 尤为受到重视。二茂铁由于有不溶于水、氧化还原可逆性好、电子传递速率高等优点 , 得到了广泛得研究与应用。 酶生物传感器 目前研究得重点就是防止二茂铁等电子媒介体得流失 , 从而提高生 物传感器得稳定性与寿命。 提高传感器稳定性得主要方法就是利用环 糊精作为载体 , 形成主客体结构。如孙康等 [10] 以β - 环糊精与戊二醛缩 合而成得聚合物 ( β-CDP)为主体 , 电子媒介体二茂铁为客体 , 形成稳 定得包络物 , 制成了葡萄糖、乳糖生物传感器。再如朱邦尚等 [10] 以电 子媒介体 1,1- 二甲基二茂铁为客体与β -CDP形成稳定得主客体包络 物。 利用二茂铁也可以制成组织传感器。 如马全红等 [12] 以二茂铁为电子 媒介体 , 将含有丰富酪氨酸酶得蘑菇组织肉浆固定在二茂铁 (PVC膜) 修饰石墨电极上制成酶电极。其对 L- 酪氨酸得线性响应范围为 2、0 10-4 ～4、5×10-3 mol/L, 响应时间小于 5 min, 电极寿命至少 30 d, 可用于实际样品分析。 提高传感器稳定性得另一种方法就是在电极表面覆盖一层 Nafion 膜。如贾能勤等 [13] 以基于丝网印刷技术制作得碳糊电极为基底电极 , 用二茂铁为电子媒介体 ,Nafion 修饰厚膜碳糊电极制成了葡萄糖传感 器。Nafion 膜既可以防止二茂铁得流失 , 又可以防止抗坏血酸、尿酸 得干扰 , 具有防污能力。该传感器得检测上限可达 18 mmol/L, 响应时 间小于 60s。 二茂铁及其衍生物对抗坏血酸具有催化作用 , 易受抗坏血酸得干 扰。而 N-甲基吩嗪则可以消除抗坏血酸等得干扰。李海虹等 [14] 通过 交联方式将辣根过氧化物酶 (HRP)固定在 Eastman-AQ—N-甲基吩嗪修 饰电极上 , 制成过氧化氢生物传感器。 将它与 GOD与半乳糖苷酶结合 , 酶生物传感器 制成双酶与三酶体系得生物传感器 , 用于葡萄糖与乳糖得测定。王朝 瑾[15] 利用 N-甲基吩嗪作