临床酶学检验技术.ppt

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临床酶学检验技术;第一节 酶学基本知识;● 酶是蛋白质,具有一、二、三级结构,有些酶还具 有四级结构。 ● 单体酶(monomeric enzyme)---只由一条多肽链构成 ● 寡聚酶 (oligomeric enzyme)---由多个相同或不同 亚基以非共价键连接的酶 ● 多酶体系(multienzyme system)---由几种不同功能 的酶彼此聚合而成的多酶复合物 ● 酶的必需基团(essential group)---及酶的活性密 切相关的基团 ● 酶的活性中心(active center)---组成具有能与底 物结合并起催化反应的特定空间结构区域;酶的命名、分类及编号; 习惯用名 英文缩写 EC编号 系统名 乳酸脱氢酶 LD(LDH) 1.1.1.27 L乳酸:NAD+氧化还原酶 单胺氧化酶 MAO 1.4.3.4 单胺:氧化还原酶 γ-谷氨酰转移酶 γ-GT/GGT 2.3.2.2 γ-谷氨酰肽:氨基酸γ-谷氨酰转移酶 门冬氨酸氨基转移酶 AST 2.6.1.1 L-门冬氨酸:α-酮戊二酸氨基转移酶 (谷草转氨酶) (GOT) 丙氨酸氨基转移酶 ALT 2.6.1.2 L-丙氨酸:α-酮戊二酸氨基转移酶 (谷丙转氨酶) (GPT) 肌酸激酶 CK 2.7.3.2 三磷酸腺苷:肌酸转磷酸酶 碱性磷酸酶 ALP(AKP) 3.1.3.1 正磷酸单酯磷酸水解酶 ;6;三、酶促反应动力学;(二)酶促反应进程;(三)酶动力学参数 ;(四)酶偶联反应 ;11;第二节 血清酶变化的生理病理机制 ;二、血清酶变化的生理病理机制 ; (一)酶活性单位 1.惯用单位 2.国际单位---在特定的条件下,一分钟内使底 物转变一微摩尔的酶量为一个国际单位。 3.Katal单位---在规定条件下,每秒钟催化转化 一摩尔底物的酶量。1katal=60×106U ;(二)酶活性浓度 指单位体积样品中的酶活性单位 (三)正常上限升高倍数(ULN) 是指用测得的酶活性结果除以参考范围上限 ;16;二、酶蛋白质量浓度表示法 ;第四节 酶催化活性浓度测定的理论基础;(三)连续监测法的方法设计 ;第五节 酶活性测定的影响因素及最适条件的确定;二、测定条件的影响及最适条件的确定;三、其他因素对测定结果的影响;第六节 同工酶检测技术; 免疫抑制法 利用同工酶的一种亚基及相应的抗 体结合后,酶活性受到抑制,测定加与不加抗体前后 样品中酶活性的变化,可以计算出该型同工酶的活性。 不加抗CK-MM血清时样品的CK活性:CK-MM和CK-MB活性; 加入抗CK-MM血清时样品的CK活性:50%CK-MB的活性; 加入抗CK-MM血清时样品的CK活性×2:CK-MB活性; 所测CK-MM和CK-MB之总活性-CK-MB活性=CK-MM活性。;第七节 目前常用诊断酶的酶活性测定;L-丙氨酸 + α-酮戊二酸 α-丙酮酸 + L-谷氨酸;27;二、肌酸激酶的测定;四、γ-谷氨酰基转移酶的测定;六、淀粉酶的测定;

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