2021年度人教版高中生物选修一专题二微生物的培养与应用知识点归纳.docVIP

专项二 微生物培养与应用 课题一 微生物实验室培养 ·培养基：人们按照微生物对营养物质不同需求，配制出供其生长繁殖营养基质，是进行微生物培养物质基本。 ·培养基按照物理性质可分为液体培养基 半固体培养基和固体培养基。在液体培养基中加入凝固剂琼脂（是从红藻中提取一种多糖，在配制培养基中用作凝固剂）后，制成琼脂固体培养基。微生物在固体培养基表面生长，可以形成肉眼可见菌落。依照菌落特性可以判断是哪一种菌。液体培养基应用于工业或生活生产，固体培养基应用于微生物分离和鉴定，半固体培养基则惯用于观测微生物运动及菌种保藏等。 ·按照成分培养基可分为人工合成培养基和天然培养基。合成培养基是用成分已知化学物质配制而成，其中成分种类比例明确，惯用于微生物分离鉴定。天然培养基是用化学成分不明天然物质配制而成，惯用于实际工业生产。 ·按照培养基用途，可将培养基分为选取培养基和鉴定培养基。选取培养基是指在培养基中加入某种化学物质，以抑制不需要微生物生长，增进所需要微生物生长。鉴别培养基是依照微生物特点，在培养基中加入某种批示剂或化学药物配制而成，用以鉴别不同类别微生物。 ·培养基化学成分涉及 水 、无机盐 、碳源 、氮源 、生长因子等。 ·碳源：能为微生物代谢提供碳元素物质。如CO2、NaHCO3等无机碳源；糖类、石油、花生粉饼等有机碳源。异养微生物只能运用有机碳源。单质碳不能作为碳源。 ·氮源：能为微生物代谢提供氮元素物质。如N2、NH3、NO3-、NH4+（无机氮源）蛋白质、氨基酸、尿素、牛肉膏、蛋白胨（有机氮源）等。只有固氮微生物才干运用N2。 ·培养基还要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气规定。例如，培养乳酸杆菌时需要在培养基中添加维生素，培养霉菌时须将培养基pH调至酸性，培养细菌是需要将pH调至中性或微碱性，培养厌氧型微生物是则需要提供无氧条件 ·无菌技术·获得纯净培养物核心是防止外来杂菌入侵，要注意如下几种方面： ①对实验操作空间、操作者衣着和手，进行清洁和消毒。 ②将用于微生物培养器皿、接种用品和培养基等器具进行灭菌。 ③为避免周边环境中微生物污染，实验操作应在酒精灯火焰附近进行。 ④实验操作时应避免已经灭菌解决材料用品与周边物品相接触。 无菌技术除了用来防止实验室培养物被其她外来微生物污染外，尚有什么目？ 答：无菌技术还能有效避免操作者自身被微生物感染。 ·消毒与灭菌区别 消毒指使用较为温和物理或化学办法仅杀死物体表面或内部一某些对人体有害微生物（不涉及芽孢和孢子）。消毒办法惯用煮沸消毒法，巴氏消毒法（对于某些不耐高温液体）尚有化学药剂（如酒精、氯气、石炭酸等）消毒、紫外线消毒。 灭菌则是指使用强烈理化因素杀死物体内外所有微生物，涉及芽孢和孢子。灭菌办法有灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌。 灭菌办法： ①接种环、接种针、试管口等使用灼烧灭菌法； ②玻璃器皿、金属用品等使用干热灭菌法，所用器械是干热灭菌箱 ； ③培养基、无菌水等使用高压蒸汽灭菌法，所用器械是高压蒸汽灭菌锅 。 ④表面灭菌和空气灭菌等使用紫外线灭菌法，所用器械是紫外灯 。 比较项 理化因素作用强度 消灭微生物数量 芽孢和孢子能否被消灭 消毒 较为温和 某些生活状态微生物 不能 灭菌 强烈 所有微生物 能 制作牛肉膏蛋白胨固体培养基 （1）办法环节：计算、称量、溶化、灭菌、倒平板。 （2）倒平板操作环节： ①将灭过菌培养皿放在火焰旁桌面上，右手拿装有培养基锥形瓶，左手拔出棉塞。 ②右手拿锥形瓶，将瓶口迅速通过火焰。 ③用左手拇指和食指将培养皿打开一条稍不不大于瓶口缝隙，右手将锥形瓶中培养基（约10～20mL）倒入培养皿，左手及时盖上培养皿皿盖。 ④等待平板冷却凝固，大概需5～10min。然后，将平板倒过来放置，使培养皿盖在下、皿底在上。 ·倒平板操作讨论 1.培养基灭菌后，需要冷却到50℃左右时，才干用来倒平板。你用什么办法来预计培养基温度？ 提示：可以用手触摸盛有培养基锥形瓶，感觉锥形瓶温度下降到刚刚不烫手时，就可以进行倒平板了。 2.为什么需要使锥形瓶瓶口通过火焰？ 答：通过灼烧灭菌，防止瓶口微生物污染培养基。 3.平板冷凝后，为什么要将平板倒置？ 答：平板冷凝后，皿盖上会凝结水珠，凝固后培养基表面湿度也比较高，将平板倒置，既可以使培养基表面水分更好地挥发，又可以防止皿盖上水珠落入培养基，导致污染。 4.在倒平板过程中，如果不小心将培养基溅在皿盖与皿底之间部位，这个平板还能用来培养微生物吗？为什么？ 答：空气中微生物也许在皿盖与皿底之间培养基上滋生，因而最佳不要用这个平板培养微生物。 纯化大肠杆菌 （1）微生物接种办法最惯用是平板划线法和稀释涂布平板法。 （2）平板划线法是通过接种环在琼脂固体培养基表面持续划线操作。将汇集菌种逐渐稀释分散到培养基表面