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第二章 细胞工程----细胞克隆;一、克隆的概念
即无性繁殖系。指不经过两个分子、两个细胞或两个个体的结合,只由一个模板分子、母细胞或母体直接形成新的分子、细胞或个体的过程。;无性生殖与有性生殖的区别;二、细胞工程:;离体器官、
组织或细胞
;实例(组织培养非洲紫罗兰); 外植体:离体的组织、细胞或器官。
愈伤组织:一群高度液态化的原始的薄壁细胞。
脱分化:分化的细胞(组织或器官)经过处理形 成愈伤组织的过程。
再分化:由愈伤组织经过处理再重新分化出不同的组织(细胞或器官)。;条件:
(1)材料离体
(2)无菌环境
(3)配制一定营养成分的培养基(固体、加蔗糖)
(4)要有一定比例的激素(细胞分裂素和生长素或类似物人工诱导)
(5)适宜的温度、PH值和光照;概念:细胞的全能性是指生物体的细胞具有使后代细胞形成完整个体的潜能。
原因:是生物体的每一个细胞都含有该物种所特有的全套遗传物质及发育为完整个体所必需的全部基因。 ;人工诱导与两种激素的关系
——在植物组织培养过程中,细胞分裂素/生长素的比例对愈伤组织的形成,以及丛芽和根的分化影响极大
——人工诱导过程的激素应用如下:;应用:;1.下列有关植物组织培养过程中细胞脱分化的说法,不正确的是( )
A、已经分化的细胞失去特有的结构和功能而转变成未分化的细胞的过程
B、已经分化的细胞转变为具有分生能力的薄壁细胞,进而形成植物愈伤组织的过程
C、离体的植物组织在一定的条件下分化出根和芽的过程
D、离体的植物组织在脱分化形成愈伤组织的过程中必须经过有关激素的诱导; 2. 植物组织培养形成的愈伤组织进行培养, 又可以分化形成根、芽等器官,这一过程称为:( ) ;2.植物体细胞杂交;理论基础:
细胞膜的流动性和细胞的全能性;白菜---甘蓝;(二)动物细胞工程;1.动物细胞培养过程:;动物细胞的培养过程;原代培养:
从机体取出后立即培养的细胞为原代细胞。培养的第1代细胞与传10代以内的细胞称为原代细胞培养。;细胞株:原代细胞一般传至10代左右细胞生长停滞,大部分细胞衰老死亡??少数细胞存活到40~50代,这种传代细胞为细胞株。
细胞系:细胞株传代至50代后又出现细胞生长停滞状态,只有部分细胞由于遗传物质的改变,使其在培养条件下可以无限制传代,这种传代细胞为细胞系。
细胞株和细胞系的区别: 细胞系的遗传物质改变,具有癌细胞的特点,失去接触抑制,容易传代培养。;动物细胞培养 的条件;动物细胞培养的应用:;动 物 组 织 培 养;2005年4月,美国一家非官方癌症研究中心发布信息说,“高露洁”牙膏中含有的抗菌化学物质三氯生可能是致癌物质。公众对此表示怀疑。科研人员欲采用一定的技术手段探究三氯生对人体是否有危害。请回答:
1、根据所学的动物细胞工程知识,采取下列哪种技术手段最合适
A、动物细胞融合 B、动物细胞培养
C、胚胎移植 D、核移植;2、根据上述选择,请你设计一个实验来探究“三氯生”对人体是否有危害。
(1)该实验的原理是
;②制备检测细胞
ⅰ配置细胞悬浮液:
ⅱ将细胞悬浮液分装到两个以上的培养瓶中,置于培养箱中培养一段时间.
③ 配置培养液:取两个培养瓶,分别编号1、2,
;④将上述某一个培养状况较好的培养瓶中的细胞培养液分成两份,分别加入1、2号培养瓶中,培养一段时间。
⑤检测过程:分别从1、2号培养瓶中取样做多次镜检,计算出变异细胞占观察培养细胞的百分数。
⑥预期结果和结论:
a:若1号和2号培养瓶中变异细胞的百分比相当,则说明“三氯生”对人体无害。
b:若1号培养瓶中变异细胞百分数大于2号,则说明“三氯生”对人体有害。
;获得细胞;2.动物的细胞融合;细胞融合与细胞杂交
——细胞融合是指由两个或多个细胞融合成一个细胞的现象
——基因型不同的细胞融合称为细胞杂交
——细胞融合是研究细胞之间遗传信息转移、染色体基因定位,以及创造新细胞株的有效途径。;诱导细胞融合的技术手段
——灭活的仙台病毒、聚乙二醇等介导
——低压交流电场中击穿细胞膜脂双层 ;动物细胞融合的原理:;比较项目;3.单克隆抗体技术:;传统方法获取抗体,产量低,而且抗体的特异性差,纯度低,反应不够灵敏。;科学家分析、探索过程:;理论方法:
用单个B淋巴细胞进行无性繁殖,也就是通过克隆,形成细胞群,由该细胞群就能产生出单克隆抗体(化学性质单一、特异性强的抗体
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