专业课题全血胆碱脂酶测定.pptVIP

实验目的 加深对有机磷农药中毒机制的认识 掌握全血ChE活性测定的意义 掌握全血ChE活性测定原理、方法 意 义 有机磷农药中毒的重要诊断指标 中毒者治疗后的效果观察指标 接触有机磷农药人员健康状况的动态观察指标 方 法 Asch-DTNB比色法（GBZ52） 三氯化铁比色法 溴麝香草酚蓝（B·T·B）比色法 纸片法 Biocheck法（便携式分析仪） 三氯化铁比色法 [原理] 乙酰胆碱 胆碱酯酶 胆碱 + 乙酸 碱性羟胺 乙酰羟胺 HCl FeCl3 羟肟酸铁(棕红色络合物) [器材] 刺针 一次性自控式微量吸管（20μl） 分光光度计 恒温水浴箱（37℃±0.5 ℃ ） [试剂] 磷酸盐缓冲液（PH=7.20） 碱性羟胺溶液 1∶2盐酸溶液 10%三氯化铁溶液 乙酰胆碱标准应用液（1ml含4μmol） [分析步骤] 1. 乙酰胆碱标准曲线的绘制 2. 样品测定 1.乙酰胆碱标准曲线的绘制 （1）取六只具塞试管，配制乙酰胆碱标准色列 管号 1 2 3 4 5 6 乙酰胆碱标准应用液（ml） 0 0.2 0.4 0.6 0.8 1.0 水（ml） 1 1 1 1 1 1 磷酸盐缓冲液（ml） 1 0.8 0.6 0.4 0.2 0 乙酰胆碱含量（μmol） 0 0.8 1.6 2.4 3.2 4.0 （2）各管加碱性羟胺4ml，立即振摇3