4种食源性致病菌的多重PCR检测方法的建立 图文.docxVIP

够在同一反应体系中同时检测不同的目的菌 够在同一反应体系中同时检测不同的目的菌 ，应用前景更 ［作者简介］钱玉春（1972-,女,硕士 ,副主任检验技师,主要 从事卫生和防病微生物检测工作。 【微生物检测方法】 4种食源性致病菌的多重PCR检测方法的建立 钱玉春，类延花，胡中旺 （合肥市疾病预防控制中心，合肥 230022 ［摘要］目的：建立一种快速、经济、实用的多重PCR方法，能同时检测4 种常见致病菌。方法：根据沙门菌的侵袭蛋白 A （invasi on p r otein A, inv A、志 贺菌的侵袭性质粒抗原 H基因（invasi on p las m id antigen, i paH、副溶血性弧菌的 属特异性 基因（ther molabile he molysi n, tl和肠致病性大肠埃希菌的微绒毛粘连基因 （eae A分别设计了 4对引物，预计PCR扩增的 目的片段依次为284、606、450、891bp。对单个基因PCR和单管多重 PCR扩增进行特异性、敏感性试验以及优化反应体系，建立了快速检测沙门菌、 志贺菌、副溶血性弧菌、肠致病性大肠埃希菌的单管多重 PCR方法结果：含沙 门菌42cfu /g、志贺菌36cfu /g、副溶血性弧菌116cfu /g、肠致病性大肠埃希菌 91cfu /g、DNA提取、扩增、电泳，在16~18h内应用多重PCR体系能够检