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第十章 DNA 的生物合成 学习要求 1．掌握 遗传信息流动的中心法则； DNA 的生物合成的方式；复制的基本规律、主要物 质及其作用机理；原核生物 DNA 复制的基本过程及各阶段特点；端粒和端粒酶的概念。 2 ．熟悉 DNA 复制的保真性依赖三种机制；真核生物 DNA 的合成过程；逆转录；突变 的概念及类型。 3．了解 半保留复制的实验依据及意义；其他复制方式； DNA 损伤及其修复的机制；突 变的意义及引起突变的因素； DNA 修复的类型； 其他复制方式。 基本知识点 中心法则阐明了遗传信息传递的规律。复制是遗传物质的代代相传，通过转录和翻译， 遗传物质表达为执行生命活动功能的各种生物大分子。生物细胞内的 DNA 复制有半保留性、 高保真性、半不连续性和双向性等特征，对理解复制过程及其意义都十分重要。半保留复制 是 DNA 复制的基本特征，并通过实验证实。复制的保真性至少依赖三种机制：遵守严格的 碱基配对规律；聚合酶在复制延长中对碱基的选择功能；复制出错时有即时的校读功能。复 制的半不连续性可理解复制过程中领头链和随从链的区别。复制的双向性阐明复制叉的形成 及其延伸、汇合。 复制以 dNTP 为原料，在 DNA 聚合酶催化下生成磷酸二酯键使 dNMP 逐一聚合生成 DNA 子链。原核生物有 DNA-pol I 、II 和 III 三种 DNA 聚合酶；真核生物有 α、 β、 γ、 δ、 ε 五种 DNA-pol ，各有独特的功能。复制还需多种其他酶和蛋白质辅助因子的参与。 原核生物的复制过程已相当清楚，其起始是将 DNA 双链解开成复制叉，形成引发体及 合成引物。在解螺旋酶的作用下解开双链，另外还需有单链 DNA 结合蛋白。而后形成有解 螺旋酶、 DnaC、引物酶和 DNA 的起始复制区域的复合结构称为引发体。在引物酶的作用下 形成引物。复制的延长由引物或延长中的子链提供 3＇-OH ，供 dNTP 掺入生成磷酸二酯键， 因此子链总是从 5 ＇→3＇方向延伸。 DNA 双链走向相反而解链只有一个方向，因此领头链 连续复制和随从链不连续复制。在电镜下观察到的复制中的不连续片段称为冈崎片段。在复 制完成前， RNA 引物须除去，留下的空隙由 DNA-pol I 催化 dNTP 的聚合而填补，片段之间 的缺口由 DNA 连接酶连接使之成为连续的子链。原核生物环状 DNA 是单复制子复制，起始 点向终止点汇合而终止复制。 真核生物复制发生于细胞周期的 S 期，起始过程需要 DNA-pol δ、α及多种蛋白质因子、 细胞周期蛋白及其相应的激酶（ CDK ）参与真核生物复制的调节。复制的延长中发生 DNA 聚合酶 α和 δ转换，且延长和核小体组蛋白的分离和重新组装有关。染色体复制能维持应有 的长度，复制的终止需要端粒酶延伸端粒 DNA 。 1 逆转录是 RNA 病毒的复制形式。 逆转录过程包括以 RNA 为模板合成单链 DNA 、杂合双 链上 RNA 的水解以及再以单链 DNA 为模板合成第二条 DNA 互补链三个步骤。在感染病毒 的细胞内，逆转录酶能催化上述三步反应。在基因工程操作上，还可用逆转录酶制备 cDNA 。 滚环复制是原核生物染色体外的基因组复制方式， D-环复制是真核生物线