实用HPLC方法的建立.pptVIP

2021/3/27 * 梯度方法开发实例 - 第六步 根据“梯度曲线下的面积越大,洗脱能力越强”的规律,试用#5曲线使3-9号峰提前,改用50-95%B见到好的现象。 2021/3/27 * 梯度方法开发实例 - 第七步 最后用50-90%B,曲线4,得到好的结果。 2021/3/27 * HPLC 条件- 试验 1 流动相:乙腈:20mM 磷酸钾缓冲液 pH 2.5 (65:35) 流速: 1.0mL/min 柱温: 30°C 紫外检测器: 254nm 进样量: 10μL 样品(mg/mL): 尿嘧啶(0.025), 3-丁基吡啶 (0.067),苯酚 (0.90), 4-苯基丁酸 (2.1),N,N-二乙基间甲苯酰胺 (0.66), 1,4二羟基蒽醌(0.20), 丙基苯 (5.0), 丁基苯 (6.7) 用流动相溶解 4.3不同PH对实验的影响 2021/3/27 * HPLC 条件- 试验 2 流动相:乙腈:20mM 磷酸盐缓冲液,pH 7.0 (65:35) 流速: 1.0mL/min 柱温: 30°C 紫外检测器: 254nm 进样体积: 10μL 样品 (mg/mL): 尿嘧啶(0.05), 3-丁基吡啶(0.02), 苯酚(1.0), 4-苯基丁胺(4.0),N,N-二乙基间甲苯酰胺(1.0), 1,