土壤酶活测定及土壤微生物总蛋白的提取、检测与纯化.docVIP

土壤酶活测定及土壤微生物总蛋白的提取、检测与纯化 　【摘要】：土壤酶是土壤的组成成分之一。土壤酶的活性与土壤物理特性、水热状况、土壤的有机、无机组分的化学组成及吸收性复合体的特征等有着密切的相关性。元蛋白质组学是近年出现的一种基于蛋白质组学对微生物群落进行研究的新技术,其定义为对特定环境混合微生物群落的所有蛋白质进行的即时的、大规模的分析。虽然目前对元蛋白质组学的研究还处在起步阶段,但是它已在特定生境的微生物研究中显现出其强大的功能。本文通过对不同施肥条件下土壤酶活性进行测定,了解胞内和胞外酶的组成；利用密度梯度离心法提取、纯化土壤菌体,超声波破碎获取菌体蛋白,再进行超滤、TCA沉淀等纯化菌体蛋白,通过SDS技术分离土壤菌体蛋白；用2D技术进一步分离纯化菌体蛋白,获取质量较好的电泳图谱,分析不同处理条件下土壤菌体蛋白的差异性及共同性,利用MS方法鉴定蛋白,通过数据查询与分析比对,解释土壤蛋白质的可能生物来源。 　红壤水稻土在不施肥(CK)、施NPK肥(NPK)以及施猪粪肥(M)三种处理条件下,其生物量、理化性质等都发生改变,土壤酶活性也存在着差异。不施肥土样脲酶活性为0.074 mg NH_3-N·g~(-1)土.3h-1,施NPK肥的为0.108 mg NH_3-N·g~(-1)土.3h-1,施猪粪的土样脲酶活性为0.191 mg NH_3-N·g~(-1)土.3h~(-1);不