【干货】去除组织自发荧光干扰的利器白激光lightgate门控技术.docxVIP

干货】去除组织自发荧光干扰的利器—白激光 Lightgate 门控技术 当今生命科学研究的趋势正在从离体( in vitro )实验逐 渐走向活体在体( in vivo )实验。但是在体( in vivo )荧光 显微成像的一大障碍在于，动植物组织普遍存在光谱宽泛的 自发荧光干扰，由此会产生很多假阳性结果。另外，动植物 组织导致的激光反射光和杂散光等信号，也会大大降低荧光 图像的信噪比，影响成像质量。 全新的徕卡 SP8 X 白激光 Lightgate 时间门控技术，可从时 间维度完全去除自发荧光、反射光和杂散光等信号的干扰， 使得组织和在体( in vivo )成像的荧光图像具有更好的信噪 比和更高的可信度。 自发荧光的激发和发射光谱通常非常宽泛，有些具有多个激 发峰，有些则没有明显的激发峰，可见光内任何谱线都能对 其激发出荧光信号 (图 1)，而且自发荧光的光谱经常与人工 标记的光谱有很大范围的重叠，例如各种种类的血红素与很 多红色染料之间就存在大面积的光谱重叠 (1) 。对于这类自发 荧光的干扰，序列扫描就无能为力了，常规的光谱拆分也收 效甚微。正是由于自发荧光的普遍存在，从而限制了很多在 体实验的开展。 图 1 不同类型血红素 ( Hb )自发荧光的光谱特性在传统共聚 焦荧光成像中，只能从光谱维度进行信号的分离与检测。当 碰到光谱非特异的自发荧光时，只从光谱维度进行信号分