液相色谱柱怎么选择？液相色谱柱分类及结构.docVIP

液相色谱柱怎么选择？液相色谱柱分类及结构 　液相色谱柱是一种用于液体色谱分析仪器，关于液相色谱柱的分类及结构，可能大多数人都不太了解，液相色谱柱的选择也是非常重要的。为了方便大家了解液相色谱柱的分类及结构，下面小编就来为大家说说液相色谱柱怎么选择？液相色谱柱分类及结构。 液相色谱柱怎么选择？ （一）液相色谱柱选择的简单思路 　1、确定分离目的确定你的应用是否要求高分离度、短分析时间、高灵敏度、长柱寿命，低的操纵本钱等等。 　2、评估分析物的化学性质评估分析物的化学性质..诸如化学结构、溶解性、稳定性等等。 　3、选择合适的色谱柱了解色谱填料的物理和化学性质。 （二）液相色谱柱选择的条件 　　A填料基质 　1、硅胶基质：纯度高本钱低，强度大，化学修饰轻易，但pH值范围有限。大多硅胶基质填料在pH2-8之间稳定，但经过特殊修饰的硅胶键合相可以稳定在pH1.5-10。 　2、聚合物基质：应用pH值范围宽，温度稳定(高温可以达到80度以上)，机械强度小。 　　B颗粒外形 　大多现代HPLC填料都是球形颗粒，但有时是不规则的颗粒。球形颗粒提供较低的柱压、较高的柱效和稳定性以及较长的柱寿命在使用高粘度的活动相时；不规则颗粒有较大比表面积和相对低廉的价格。　 C颗粒粒径 　粒径越小柱效越高、分离度越高，但同时会导致较高柱压降。选择1.5-3μm的填料以解决一些复杂样品,UPLC可以使用1.5μm的填料；另外10μm或更大粒径的填料用作半制备或制备柱。 D含碳量 　含碳量指的是硅胶表面键合相的比例，与比表面积和键合覆盖度等有关。高含碳量进步柱容量、分辨率及分析时间，用于要求高分离度的复杂样品；低含碳量分析时间短、展现不同的选择性，用于快速分析简单样品及需要高含水活动相条件的样品。一般C18的含碳量在7-19%不等。 E孔径和比表面积 　HPLC吸附介质是多孔的颗粒，尽大多数的反应表面于孔内。因此，分子必须进进孔内才能被吸附和分离。 　孔径和比表面积是相辅相成的两个概念。孔径小比表面积大，反之亦然。比表面积大，增加样品与键合相之间的反应，增加保存,上样量和复杂成分的分离度；比表面积小，平衡时间快，适合梯度分析。 F孔容和机械强度 　孔容，又称“孔体积”。指单位颗粒的空隙体积大小。它能很好的反应填料的机械强度。孔体积大的填料相对孔体积小的填料机械强度要略弱。孔体积为1.5mL/g或更小的填料大多用于HPLC分离，而孔体积大于1.5mL/g的填料使用于尺寸排阻色谱和低压色谱。 G封端封端 　封端能够降低极性碱性化合物由于与裸露的硅醇基相互作用而产生的拖尾峰。不封端键合相相对封端键合相会产生不同的选择性，尤其是极性样品。 液相色谱柱分类 　色谱柱按用途可分为分析型和制备型两类 　①常规分析柱（常量柱），内径2~5mm,柱长10~30cm； 　②窄径柱（narrowbore），内径1~2mm，柱长10~20cm； 　③毛细管柱（又称微柱microcolumn），内径0.2~0.5mm； 　④半制备柱，内径＞5mm； 　⑤实验室制备柱，内径20~40mm，柱长10~30cm； 　⑥生产制备柱内径可达几十厘米。 液相色谱柱的结构 　a、空柱由柱接头、柱管及滤片组装而成 　柱接头采用低死体积结构，柱接头是两端螺纹组件，一端是为7/16英寸外螺纹，另一端是3/16英寸的内螺纹(国内外已规范化)。7/16英寸外螺纹与1/4英寸柱管(Φ6.35mm)连接，中间放置压坏用于密封。3/16英寸的内螺纹与1/16英寸(Φ1.57mm)的连接管连接，中间也放置压环用于柱接头的密封。为了尽量减少柱外死体积，在安装色谱柱时，用Φ1.57mm连接管通过空心螺钉压环后要尽量插到底，然后再拧紧空心螺钉。压环被空心螺钉挤压变形后紧箍在连接管上(连接管通过压环后露出的管长度应严格控制在2.5mm长或其他固定尺寸)。 　在两端柱接头内，柱管两端各放置一片不锈钢滤片(或滤网)，用于封堵柱填料不被流动相冲出柱外而流失。空柱各组件均为316#不锈钢材质，能耐受一般的溶剂作用。但由于含氯化物的溶剂对其有一定的腐蚀性，故使用时要注意，柱及连接管内不能长时间存留此类溶剂，以避免腐蚀。 　b、柱填料： 　液相色谱柱的分离作用是在填料与流动相之间进行的，柱子的分类是依据填料类型而定。 　正相柱：多以硅胶为柱填料。根据外型可分为无定型和球型两种，其颗粒直径在3—10 　μm的范围内。另一类正相填料是硅胶表面键合—CN，-NH2等官能团即所谓的键合相硅胶。 　反相柱：主要是以硅胶为基质，在其表面键合十八烷基官能团(ODS)的非极性填料。也有无定型和球型之分。 　常用的其他的反相填料还有键合C8、C4、C2、苯基等，其颗粒粒径在3—10μm之间。 　以上的知识就是小编为大家介绍的液相色谱柱怎么选择？液相色谱柱