紫外可见分光度计测什么？分光光度计的用途及工作原理.docVIP

紫外可见分光度计测什么？分光光度计的用途及工作原理 　分光光度计又叫做光谱仪，是将成分复杂的光，分解为光谱线的科学仪器。是食品厂、饮用水厂办理QS、HACCP认证的必备检验设备，那么紫外可见分光度计测什么？分光光度计的用途及工作原理又是什么呢？ 紫外可见分光度计测什么？ 1）测定溶液中物质的含量 　测定标准溶液（浓度已知的溶液）和未知液（浓度待测定的溶液）的吸光度，进行比较，由于所用吸收池的厚度是一样的。也可以先测出不同浓度的标准液的吸光度，绘制标准曲线，在选定的浓度范围内标准曲线应该是一条直线，然后测定出未知液的吸光度，即可从标准曲线上查到其相对应的浓度。 　　2）用紫外光谱鉴定化合物 　用各种波长不同的单色光分别通过某一浓度的溶液，测定此溶液对每一种单色光的吸光度，然后以波长为横座标，以吸光度为纵座标绘制吸光度──波长曲线，此曲线即吸收光谱曲线。各种物质有它自己一定的吸收光谱曲线，因此用吸收光谱曲线图可以进行物质种类的鉴定。紫外吸收光谱比较简单，同一种物质的紫外吸收光谱应完全。 分光光度计的用途 （1）可见分光光度计 　用来测量待测物质对可见光（400～760nm）的吸光度并进行定量分析的仪器，称为可见分光光度计。可在600nm测定细菌细胞密度。 （2）紫外可见分光光度计 　紫外可见光谱仪用来测量待测物质对可见光或紫外光（200～760nm）的吸光度并进行定量分析的仪器。可以测定核酸和蛋白的浓度，也可以测定细菌细胞密度。 　紫外分光光度计又可分为单光束，假双光束，双光束。它们的用途又有区别。 　单光束：适于在给定波长处测量吸光度或透光度，一般不能作全波段光谱扫描，要求光源和检测器具有很高的稳定性。双光束：自动记录，快速全波段扫描。可消除光源不稳定、检测器灵敏度变化等因素的影响，特别适合于结构分析。仪器复杂，价格较高。 　假双光束也就是比例双光束，它的原理是由同一单色器发出的光被分成两束，一束直接到达检测器，另一束通过样品后到达另一个检测器。这种仪器的优点是可以监测光源变化带来的误差，但是并不能消除参比造成的影响。 　　（3）红外分光光度计 　一般的红外光谱是指大于760nm的红外光谱，这是研究有机化合物最常用的光谱区域，能分析各种状态（气、液、固）的试样。红外光谱法的特点是：快速、样品量少（几微克-几毫克），特征性强（各种物质有其特定的红外光谱图）、能分析各种状态（气、液、固）的试样以及不破坏样品。 （4）荧光分光光度计 　荧光分光光度计是用于扫描液相荧光标记物所发出的荧光光谱的一种仪器。应用于科研、化工、医药、生化、环保以及临床检验、食品检验、教学实验等领域。 　通过对这些参数的测定，不但可以做一般的定量分析，而且还可以推断分子在各种环境下的构象变化，从而阐明分子结构与功能之间的关系。 （5）原子吸收分光光度计 　该法主要适用样品中微量及痕量组分分析常规仪器之一。是材料分析及质量控制部门进行常量、微量金属（半金属）元素分析的有力工具。 分光光度计工作原理 　分光光度计的基本工作原理是基于物质对光（对光的波长）的吸收具有选择性，不同的物质都有各自的吸收光带，所以，当光色散后的光谱通过某一溶液时，其中某些波长的光线就会被溶液吸收。在一定的波长下，溶液中物质的浓度与光能量减弱的程度有一定的比例关系，即符合比尔定律。 　T=I/Iolg（Io/I）=εcb 　式中，T为透过率，Io为入射光强度，I为透射光强度，A为消光值（吸光度），ε为吸收系数，b为溶液的光径长度，c为溶液的浓度。从以上公式可以看出，当入射光、吸收系数和溶液厚度一定时，透光率是根据溶液的浓度而变化的。 　分光光度计已经成为现代分子生物实验室常规仪器。常用于核酸，蛋白定量以及细菌生长浓度的定量。 　紫外可见分光度计测什么？分光光度计的用途及工作原理就为大家介绍到这里，分光光度计已经成为现代分子生物实验室常规仪器。常用于核酸，蛋白定量以及细菌生长浓度的定量，仪器主要由光源、单色器、样品室、检测器、信号处理器和显示与存储系统组成。