第五章细菌与噬菌体遗传b.pptVIP

5.3 噬菌体的遗传和作图;1??噬菌体的突变型及基因重组的特点 噬菌体的遗传重组与细菌不同，与真核生物的重组十份相似，但噬菌体遗传有一些特殊现象。 （1）从单个混合感染的细菌中可得到亲本和重组噬菌体。 例如两个不同的噬菌体A+B-和A-B+同时感染一个细菌细胞，可释放出亲本噬菌体A+B-和A-B+及重组噬菌体A+B+和A-B-，但A-B-选不出来。 （2）三亲本重组体的出现 把三种突变型的噬菌体（x-y+z+、x+y-z+、x+y+z-）混合感染同一细菌，有重组型（x+y+z+、x-y-z-）出现，表明三个噬菌体中重复发生2次基因重组才能得到三亲重组体。重组可以一再发生，这与细菌不同。 ; T2噬菌体： ① 噬菌斑形状 正常噬菌体r + ：噬菌斑小而边缘模糊 r - 突变体（速溶性）：噬菌斑大而边缘清楚 ② 寄主范围： h + 噬菌体：只侵染大肠杆菌B株→半透明噬菌斑 h - 突变株：能利用B株和B/2株→透明噬菌斑 ;E.coli 1 和 2;;T2的环形遗传图;;λ噬菌体的基因重组与作图 Kaisei 1955年用紫外线照射处理λ噬菌体，得到5个突变系，每一个突变系产生一个特殊的噬菌斑表型。（病毒是单倍体，与二倍体不同，亲本组合与交换型组合可以直接从后代中表现出来）;例1：λ噬菌体s co1 mi× + + +的杂交结果;m 12.9 r 20.8 tu ;3 Benzer的重组实验（基因的精细作图）; 表5-10 T4野生型和突变型的区别;由于T4 rII的生长是由条件的，所以可用选择技术，把所有的rII突变型成对杂交，计算每对突变位置间的重组频率。;第五章细菌与噬菌体遗传B;重组值计算：重组子rxry的数量与重组子r+r+ 数量相同，但重组子rxry不能生长，故计算时r+r+ 噬菌体数×2为实际重组子数量。 　　 ;此种测定方法称为重组测验（recombination test) ，它以遗传图的方式确定突变子之间关系。 实测rII区两个突变位点的最小重组率为0.02％，即0.02个图距，约相当于2.2bp。 因此，重组子的单位可小到1个核苷酸对。故本泽的选择技术称为基因的精细作图。 ;4 噬菌体的互补测验;顺反子是指通过顺反测验所确定的遗传单位，是DNA分子的一段序列。在一个基因内部，可以发生若干不同位点的突变，倘若在一个基因内部发生两个以上位点的突变，其顺式和反式结构的表型效应是不同的，基因内部的功能互补群称为顺反子。;;;（2）rII顺反测验;;对顺反子现象的解释： 同一顺反子的两个突变（反式结构）：两个突变位点分居于A顺反子的两个等位基因上，使两个相同的等位基因都失去功能（不能形成有功能的蛋白）。 其它三种情况突变位点所处的位置，两个相同的等位基因都能产生互补作用。 ;;;（3）缺失作图;缺失作图：Benzer根据这一原理很方便地把数千个独立的rⅡ突变定位在rⅡ遗传图上更小的区段内，此方法称缺失作图。 凡是能和某一缺失突变进行重组的，他的位置一定不在缺失范围内，凡是不能重组的，它的位置一定在缺失范围内。 本泽使用一组重叠缺失系与某一新的突变进行杂交，通过是否能产生野生型重组体来确定突变的具体位置。;缺失作图方法（P107）