(四)基因载体 定义 为携带目的基因,实现其无性繁殖或表达有意义的蛋白质所采用的一些DNA分子。 常用载体(??) 质粒DNA、噬菌体DNA、病毒DNA 这些载体均需经人工构建,除去致病基因,并赋予一些新的功能,如有利于进行筛选的标志基因、单一的限制酶切点等。 * ppt课件 载体的选择标准: 能自主复制; 具有两个以上的遗传标记物,便于重组体的筛选和鉴定; 有克隆位点(外源DNA插入点),常具有多个单一酶切位点,称为多克隆位点; 分子量小,以容纳较大的外源DNA。 * ppt课件 克隆载体(cloning vector) 为使插入的外源DNA序列被扩增而特意设计的载体称为克隆载体。 表达载体(expression vector) 为使插入的外源DNA序列可转录翻译成 多肽链而特意设计的载体称为表达载体。 * ppt课件 质粒 (plasmid) 特点: 能在宿主细胞内独立自主复制;带有某些遗传信息, 会赋予宿主细胞一些遗传性状。 概念:是存在于细菌染色体外的小型环状双链DNA分子,大小为1-200kb。 * ppt课件 耐四环素基因 * ppt课件 耐氨苄青霉素基因 * ppt课件 λ噬菌体DNA改造系统 λgt系列(插入型,适用cDNA克隆) EMBL系列(置换型,适用基因组克隆) 噬菌体(phage) M13噬菌体DNA改造系统(含l
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