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流式细胞技术与流式细胞仪flow cytometry Flow Cytometer(FCM) ;主要内容;流式细胞仪的发展简史;1969年Van Dilla 和Los Alamos采用了Crosland-Taylor设计的层流流动室和氩离子激光器开发出了液流束、照明光轴，检测系统三者互相垂直的流式细胞仪，成为目前各种流式细胞测量仪的基础。 1972年，数位研究者在斯坦佛大学研制了一台荧光激活细胞分选仪，它标志着流式细胞仪商品化时代的真正到来。1974年，BD公司正式投产，商品名FACS-1TM. 目前的主流生产商，美国的BD公司、Coulter公司。;一、流式细胞仪的基本原理;（一）流式细胞仪的分析原理;;; 通过流式细胞仪进行细胞分选主要是在对具有某种特征的细胞需进一步培养和研究时进行的。;细胞悬液形成液流柱;二、流式细胞仪的基本结构;（一）流动室;鞘流原理;鞘流原理;鞘流原理;鞘流原理;液流驱动系统;（二）激光光源;;(二)激光光源;（三）光学系统;光学系统示意图; 细胞通过激光照射区时 ，受激光激发，产生代表细胞内不同物质、不同波长的荧光信号，这些信号以细胞为中心，向空间360度立体角发射，产生散色光和荧光信号。;（四）信号检测系统;（1）前向散射光：激光束照射细胞时，光以相对轴较小角度(0.5°～10°)向前方散射的信号用于检测细胞等粒子的表面属性，信号强弱与细胞体积大小成正比。 ;;（2）侧向散射光：激光束照射细胞时，光以90°角散射的信号，侧向散射光对细胞膜、胞质、核膜的折射率更为敏感，可提供有关细胞内精细结构和颗粒性质的信息。 ;;;（3）荧光检测;;;（1）荧光信号的面积和宽度 ;;（2）荧光补偿原理;双激光立体光路技术;;;; Gate设置：指在某一张选定参数的直方图上，根据该图的细胞群分布选定其中想要分析的特定细胞群，并要求该样本所有其他参数组合的直方图只体现这群细胞的分布情况。;;单参数直方图;;1.双参数直方图点图;;2. 二维等高图;二维等高图;3. 假三维等高图;（三）三参数直方图;;（六）细胞分选器;;;;三、主要性能指标;;FACSCalibur;;四、流式细胞仪应用的技术要求;五、临床应用;;1969年Van Dilla 和Los Alamos采用了Crosland-Taylor设计的层流流动室和氩离子激光器开发出了液流束、照明??轴，检测系统三者互相垂直的流式细胞仪，成为目前各种流式细胞测量仪的基础。 1972年，数位研究者在斯坦佛大学研制了一台荧光激活细胞分选仪，它标志着流式细胞仪商品化时代的真正到来。1974年，BD公司正式投产，商品名FACS-1TM. 目前的主流生产商，美国的BD公司、Coulter公司。;（一）流式细胞仪的分析原理;;（2）荧光补偿原理;;;