2020-2021某大学《动物有害生物检疫学》期末课程考试试卷A（含答案）.docVIP

院系：________________专业班级：_____________姓名：______________学号：_____________ 装 订 线2020-2021《动物有害生物检疫学》期末课程考试试卷 院系：________________专业班级：_____________姓名：______________学号：_____________ 装 订 线 专业：时间： 120分钟，总分：100，形式：考查 一、简述细菌革兰氏染色原理和操作步骤。（20分） 二、简述间接法ELISA检测抗体的基本原理（20分） 三、简述乳胶凝集试验检测抗体的原理（20分） 四、简述新城疫病毒血凝试验原理和操作步骤（20分） 五、写出动物检疫实验常用设备名称和用途：（20分） 院系：________________专业班级：_____________姓名：______________学号：_____________ 装 订 线2020-2021《动物有害生物检疫学》期末课程考试试卷A答案 院系：________________专业班级：_____________姓名：______________学号：_____________ 装 订 线 专业：，时间120分钟，总分：100，形式：考查 一、简述细菌革兰氏染色原理和操作步骤。（20分） 答： 1、原理：阳性菌细胞壁厚，主要成分为粘肽，脂类少，脱色时不能脱去结晶紫与碘复合物，而呈蓝紫色；阴性菌细胞壁薄，粘肽含量少，而脂类多，脱色时脂类被脱去而使细胞壁变得疏松，结晶紫与碘复合被酒精脱出，复染后呈红色。 2、步骤：（1）结晶紫初染，1-3min——水洗、（2）碘液媒染，1-3min——水洗、（3）95%乙醇脱色，15-30sec——水洗、（4）沙黄复染，15sec——水洗四步。 二、简述间接法ELISA检测抗体的基本原理（20分） 答： （1）将液相抗原包被于酶标板塑料固相上； （2）加上待检测抗体（血清），进行反应；反应后充分洗涤去除未反应血清； （3）加上酶标二抗（间接抗体，如检测猪血清中的抗体，即可加鼠抗猪酶标二抗）反应，反应后充分洗涤去除未反应酶标二抗； （4）加上酶的底物，适当显色； （5）加终止液，终止反应；再将反应板置酶标仪中检测吸光率或透光率OD值。 （6）根据反应颜色的深浅，即判断待检溶液是否有抗体，并可适当定量。 三、简述乳胶凝集试验检测抗体的原理（20分） 答： 1、原理：通过将可溶性抗原致敏乳胶颗粒，可与特异性的抗体结合。利用可溶性抗原致敏的乳胶来检测抗体叫乳胶凝集试验。 2、步骤： （1）制备适当大小颗粒均匀稳定的乳胶颗粒； （2）、将抗原致敏乳胶颗粒； （3）、取待检血清与等量乳胶混匀； （4）、37度反应1小时，根据乳胶是否出现凝集，判断血清中是否有相应的抗体。 四、简述新城疫病毒血凝试验原理和操作步骤（20分） 答： 1、原理：因新城疫病毒囊膜表面有HN，可引起部分动物红细胞凝集，吸附红细胞。当新城疫病毒浓度高时，还可以引进红细胞溶解。根据病毒的这个特征，通过是否引起红细胞凝集，来检测待检溶液中是否有新城疫病毒。 2、操作步骤： （1）制备1%鸡红细胞，准备相关材料和试剂； （2）按照术式，在96孔血凝板中，以对倍稀释方法，稀释待检溶液； （3）加入定量的1%红细胞，微量振器上混匀，置37度温箱15Min左右； （4）观察结果，并判断血凝价。 五、写出动物检疫实验室常用设备名称和用途：（20分） 答： 低速、高速离心机；冷冻离心机；超净工作台；生物安全柜；各种恒温箱；恒瘟摇床；恒温干燥箱；高压蒸汽灭菌器；显微镜；酶标仪；PCR仪；紫外分析系统；电泳系统；细菌鉴定系统；无菌室；冰箱；超低温冰箱；各种微量移液器；空调、电脑、工作台；以及各种常规玻璃器皿等。