基因工程的基本操作程序PPT课件.ppt

受体细胞 方法 植物细胞(体细胞) ①农杆菌转化法：目的基因插入Ti质粒的T-DNA→农杆菌→导入植物细胞→稳定维持和表达 ②基因枪法：是单子叶植物中常用的一种基因转化方法，但是成本较高 ③花粉管通道法：这是我国科学家独创的一种方法，是一种十分简便经济的方法 动物细胞(受精卵) 显微注射法：含有目的基因的表达载体提纯→取卵(受精卵)→显微注射→受精卵发育→获得具有新性状的动物 微生物细胞(原核细胞) Ca2＋处理细胞→感受态细胞→表达载体与感受态细胞混合→感受态细胞吸收DNA分子→目的基因随受体细胞的繁殖而复制 比较 起始(终止)密码子 启动(终止)子 本质 三个相邻碱基 DNA片段 位置 位于mRNA上 位于DNA上 作用 启动(终止)翻译 启动(终止)转录 类型 步骤 检测内容 方法 结果显示 分子水平检测 第一步 目的基因是否进入受体细胞 DNA分子杂交(DNA和DNA之间) 是否成功显示出杂交带 第二步 目的基因是否转录出mRNA 分子杂交技术(DNA和mRNA之间) 是否成功显示出杂交带 第三步 目的基因是否翻译出蛋白质 抗原—抗体杂交 是否成功显示出杂交带 个体水平鉴定 需要做抗虫、抗病的接种实验，以确定是否有抗性以及抗性的程度；基因工程产品与天然产品的功能进行活性比较，以确定二者的功能活性是否相同等 生物选修3（人教版） 专题1 基因工程 1.2 基因工程的基本操作程序 比较 DNA复制 PCR技术 区别 解旋 方式 解旋酶催化 DNA在高温作用下变性解旋 场所 细胞内(主要在细胞核内) 细胞外(主要在PCR扩增仪内) 区别 酶 DNA解旋酶、普通的DNA聚合酶等 耐热的DNA聚合酶(Taq聚合酶) 温度 条件 细胞内温和条件 需控制温度，在较高温度下进行 合成的 对象 DNA分子 DNA片段或基因 联系 ①模板：均需要脱氧核苷酸链作为模板进行物质合成 ②原料：均为四种脱氧核苷酸 ③酶：均需要DNA聚合酶进行催化 ④引物：均需要引物，使DNA聚合酶从引物的3′端开始连接脱氧核苷酸