高中生物选修三超详细知识点整理(完整加强版).docx

名师归纳总结生物选修3 知识点（区别不同工程和不同操作水平）专题 1基因工程概念： 按照人们的愿望，进行严格的设计，通过体外DNA重组和转基因技术，赋予生物新的遗传特性，创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。基本原理：让目的基因在受体细胞内稳定且高效的表达理论基础： DNA 是生物遗传物质的发现，DNA 双螺旋结构，遗传信息传递方式核心：构建重组DNA 分子（一）基本工具（技术基础）Cf 工具 工具酶 1. 限制性核酸内切酶（1）来源：主要是从原核生物中分离纯化出来的（不切割自身DNA 名师归纳总结 生物选修 3 知识点 （区别不同工程和不同操作水平） 专题 1 基因工程 概念： 按照人们的愿望， 进行严格的设计，通过体外 DNA重组和转基因技术，赋予生物 新的遗传特性，创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。 基本原理：让目的基因在受体细胞内稳定且高效的表达 理论基础： DNA 是生物遗传物质的发现， DNA 双螺旋结构，遗传信息传递方式 核心：构建重组 DNA 分子 （一）基本工具（技术基础） Cf 工具 工具酶 1. 限制性核酸内切酶 （1）来源：主要是从原核生物中分离纯化出来的 （不切割自身 DNA的原因：原核生物中无该限制酶的识别序列或其已被修饰） （2） 功能 ：识别和切割 DNA分子内一小段特殊的脱氧核苷酸序列（偶数碱基对回文序列） 特异性表现： 识别特定片段、 切割该片段中的特定位点、 形成一种末 端 —G↓ GATCC— —↓ GATC— Cf （3）结果： DNA片段末端形成末端碱基互补的黏性末端或平末端 ① 用 切割（质粒） ②根据目的基因的位置或剪辑序列来确定限制酶的种类 ③切割后的片段要画全 2.DNA连接酶 （1） 功能 ：连接具有末端碱基互补的 2 个 DNA片段，形成重组 DNA分子 Cf DNA 聚合酶：只能将单个脱氧核苷酸逐个添加到已有的脱氧核苷酸链之后， 需模板 DNA，连接磷酸二酯键 3. 载体 （1） 条件 ：①能在受体细胞中稳定保存并大量复制，基本不影响受体细胞正常生命活动 ②一至多个限制酶酶切位点（必须在所需标记基因外），供外源 DNA片段插入 ③标记基因，便于筛选含有重组 ——往往需要根据需求改造天然载体 DNA分子的受体细胞 （2） 功能 ：①作为运载工具将目的基因转移到受体细胞内 ——载体选质粒的原因：具有环状结构，能够携带目的基因 ②利用它在受体细胞内对目的基因进行大量复制和转录 （3）质粒（最常用的载体） / 表达 一种能够自主复制， 在细菌 ( 或酵母菌 ) 中独立于染色体之外存在的双链环状 DNA 分子 （4）其它载体：噬菌体、动植物病毒 ( 二) 基因工程的基本操作程序 第一步：获取目的基因 1. 目的基因：人们所需要的编码蛋白质的结构基因 2. 方法 (1) 序列已知 精品学习资料 第 1 页，共 9 页 名师归纳总结①化学合成法 ——较长 DNA单链合成过程中容易出现碱基缺失如 反转录法 （ e.g 获取 mRNA逆转录成 cDNA再用 DNA聚合酶生成双链）② 聚合酶链式反应(PCR)扩增Polymerase Chain Reaction（ 1）原料 ：水、缓冲液、 4 种游离脱氧核苷酸、TaqDNA聚合酶、模板基因 ) 、DNA(对基因特异的2 段 DNA引物（防止相互或自身折叠）90 名师归纳总结 ①化学合成法 ——较长 DNA单链合成过程中容易出现碱基缺失 如 反转录法 （ e.g 获取 mRNA逆转录成 cDNA再用 DNA聚合酶生成双链） ② 聚合酶链式反应 (PCR)扩增 Polymerase Chain Reaction （ 1）原料 ：水、缓冲液、 4 种游离脱氧核苷酸、 TaqDNA聚合酶、模板 基因 ) 、 DNA( 对 基因特异的 2 段 DNA引物（防止相互或自身折叠） 90～95℃， DNA在高温下变性解链 （ 2）过程：第一步：加热至 第二步：冷却到 第三步：加热至 55～60℃，引物结合到互补 DNA链（退火） 70～75℃，热稳定 DNA聚合酶从引物起始互补链的合成 能量来源于 dNTP (2) 序列未知 建立基因文库： 建立一个包括目的基因在内的基因文库 ( 保存在受体菌中 ) ，再从基因文库中获取 3. 目的基因大量扩增 ①利用受体细胞（如 / 分子水平的克隆 E.coli ）无性繁殖，利用基因探针钓取，再导入最终受体细胞 目的基因→大肠杆菌→农杆菌→植物细胞→植物 e.g （主要在细菌分裂时几何级扩增，尽管质粒独立于拟核，可在分裂时发生自我复制， 但由于多数细菌对胞内质粒数量有限制，故该种复制对扩增效果不大） ② PCR技术 第二步：形成重组 DNA分子（基因表达载体：启动子＋目