第4节酶活性浓度测定技术.pptVIP

第四节 酶活性浓度的测定技术 一、概 述 1．量气法： 　 此法很少采用。 2．分光光度法： 其最大优点在于扩大了测定范围，波长范围更宽。结合各种工具酶的偶联反应，如应用NAD(P)H和NAD(P)+吸收光谱差异建立的测定各种脱氢酶活性浓度的方法，使分光光度法得到了进一步发展，几乎可应用于各种血清酶活性的测定。随着各种自动生物化学仪和配套用试剂盒的普及应用，这一方法在临床酶学测定中起着十分重要的作用。 ; 3．荧光法和放射性核素法: 对于一些酶浓度很低的标本，可考虑改用灵敏度较高的荧光法或放射性核素法。荧光法取决于酶促反应生成荧光物质的速率，此速率与酶浓度成正比，并通过荧光光度计进行测定，根据荧光强弱的变化换算出酶的活性。例如，还原型的NAD(P)H有强烈的荧光，故所有以NAD(P)+为辅酶的氧化还原酶类均可用荧光法进行测定。核素法因有污染且操作烦杂，目前应用较少。 4．其他方法: ; 二、酶活性浓度的测定 测定酶的催化活性浓度是临床酶学分析最为常用的方法，具有迅速、灵敏、成本低等特点。可根据酶促反应进程曲线，采用合理的方法进行酶活性浓度的测定。 ; (一) 酶促反应进程;第4节酶活性浓度测定技术; (二) 酶活性浓度测定方法 酶活性浓