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人胃腺癌细胞株 AGS、SGC-7901 增殖诱导配体 mRNA 的表达 （作者 :___________单位 : ___________ 邮编 : ___________ ） 【摘要】 目的：比较人 AGS、SGC-7901两种胃癌细胞株中增殖诱 导配体 (APRIL) mRNA 的表达水平。方法：通过半定量 RT-PCR检测 APRIL mRNA，筛选出 APRIL mRNA高表达细胞株。结果：以 GAPDH为 内参，通过计算机图像扫描系统分析各株细胞 APRIL mRNA的表达量 , 获得人胃腺癌细胞株 APRIL mRNA表达量的相对值， AGS 0.09 ， SGC-7901 0.61。结论：  SGC-7901为  APRIL mRNA高表达细胞株。 【关键词】 胃腺癌 聚合酶链反应 增殖诱导配体 [Abstract] Objective: To detect the expression of human  ’ s stomach adenocarcinoma cell line ’s APRIL in the mRNA level by semi-quantitaive RT-PCR. Methods: We detected the expression of APRIL mRNA in stomach adenocarcinoma cell line (AGS and SGC-7901) by RT-PCR, and then selected high-level expression cell line. Results: Using by the image scanning system， GAPDH as the internal control, we get the relative value of AGS 0.09 ， SGC-7901 0.61.Conclusion: Selecting high-level expression APRIL mRNA cell line in stomach adenocarcinoma by semi-quantitative RT-PCR, it does play a fundamental role in the research for molecular mechanism for stomach cancer developing and metastasizing. [Key words] Stomach adenocarcinoma; Polymerase chain reaction; A proliferation-inducing ligand 增殖诱导配体（  a proliferation-inducing ligand  ， APRIL）是 肿瘤坏死因子  (tumor necrosis factor  ，TNF)超家族的成员之一  [1  ， 2]  。主要通过靶细胞表面的两个受体——穿膜蛋白活化物  (TACI)  和  B 细胞成熟抗原 (BCMA)结合，从而促进肿瘤细胞的增殖， 调节体液免疫， 并参与 B、T 淋巴细胞增殖和活化 [3~8] 。已有研究证实 APRIL在体内 和体外均能刺激肿瘤细胞生长，说明它与肿瘤生长的调节关系密切 。我们研究发现 APRIL 在胃癌病变演变过程中呈现累积和渐进趋势。提示 APRIL在胃癌发生、发展过程中可能起重要作用，但其分子 机制还有待进一步研究证实。本研究采用半定量 RT-PCR技术从 2 株 胃腺癌细胞株中筛选出 APRIL基因高表达细胞株， 为进一步了解它在 胃腺癌发生、发展过程中的作用及其分子机制等研究奠定实验基础。 材料与方法 1.1 材料 （1）细胞株及培养液：胃腺癌细胞株 AGS、 SGC-7901 和胰腺癌细胞株 CFPAC-（1中科院上海生科院细胞资源中心） ，DMEM、 IMDM 、RPMI 1640和 Ham’s F12k 细胞培养基（美国 Invitrogen 公 司），新生牛血清和胎牛血清 （Hyclone 公司）；（2）主要试剂和仪器： TRIzol （Invitrogen 公司），TaKaRa逆转录试剂盒、 Taq 聚合酶、限 制性内切酶（ TaKaRa生物技术公司，大连），XP Thermal cycle PCR 仪（杭州博日） ， Queue Stabil-Therm 37 ℃ 恒温孵育箱 (Revco Technologies USA) ；（3）引物：根据 GenBank APRIL基因序列（ NM 003808.2 ）和磷酸甘油醛脱氢酶 (GAPDH)基因序列（ NM002064），利用 VECTOR