遗传代谢性疾病的基因诊断.pptxVIP

第十九章 遗传代谢性疾病  的基因诊断 ; 主要内容 ;细胞、组织、器官和机体的生存与功能维持都必须依赖不断进行的物质代谢过程。 物质代谢包括合成代谢及分解代谢两个过程。 代谢性疾病是物质代谢过程的紊乱，多为酶或蛋白异常所致。 根据代谢性疾病的病因，可将其分为原发性和继发性。;一、代谢性疾病的分类 ;二、代谢性疾病的诊断手段 ;基因诊断的概念 ;基因诊断的特点 ;;一、DNA测序技术 ;双脱氧链终止法 ; 返回节 ;示例：BigDye? Terminators 循环测序反应扩增到未端为BigDye? Terminators的一系列的核苷酸链。 循环测序反应产物经沉淀、洗涤和纯化，从而去除多余的未反应的BigDye? Terminators。 电泳与结果分析。; 返回节 ;焦磷酸测序技术 ; 返回节 ; 基本流程：第1步 一个特异性的测序引物和单链DNA模板结合，然后加入酶混合物(包括DNA Polymerase、ATP Sulfurylase、Luciferase和三磷酸腺苷双磷酸酶Apyrase)和底物混合物(包括腺苷酰硫酸APS和Luciferin)。; 基本流程：第2步 向反应体系中加入1种dNTP，如果它刚好能和DNA模板的下一个碱基配对，则会在DNA 聚合酶的作用下，添加到测序引物的3’末端，同时释放出一个分子的焦磷酸(PPi)。; 基本流程：第3步 在ATP硫酸化酶的作用下，生成的PPi可以和APS结合形成ATP；在荧光素酶的催化下，生成的ATP又可以和荧光素结合形成氧化荧光素，同时产生可见光。通过CCD光学系统即可获得一个特异的检测峰，峰值高低则和相匹配的碱基数成正比。; 基本流程：第4步 反应体系中剩余的dNTP和残留的少量ATP在Apyrase的作用下发生降解。; 基本流程：第5步 加入另一种dNTP，使 第2－4步反应重复进 行，根据获得的峰值 图即可读取准确的DNA 序列信息; 返回节 ;二、聚合酶链反应技术 ;三、毛细管电泳技术 ; ;四、基因芯片技术 ; 第二节 遗传代谢性疾病的基因诊断 ;遗传代谢性疾病的病理生理改变特征 ;遗传代谢性疾病的发病特点 ;代谢性疾病的基因诊断策略 ;二、苯丙酮酸尿症(PKU) ;;临床表现; 基因诊断;三、同型胱氨酸尿症(HCU) ;病 因 ;临床表现;基因诊断 ; 返回节 ;四、酪氨酸血症 ;病 因 ;分型 酪氨酸血症I型: 延胡索酸酰乙酰乙酸水解酶缺乏 酪氨酸血症II型:酪氨酸转氨酶缺乏 酪氨酸血症III型:对羟苯基丙酮酸双氧化酶缺乏;基因诊断 ;五、半乳糖血症 ;病因 ;临床表现 ;基因诊断 ;六、糖原累积症 ;病因与临床表现 ; 返回节 ;分型 ;基因诊断 ;七、果糖不耐症 ;病因 ; 基因诊断 ;八、家族性高脂蛋白血症 ;病因与临床表现 ;II型高脂蛋白血症 家族性高胆固醇血症： 病因是细胞的LDL受体缺如或缺乏，导致LDL清除延迟而导致血浆LDL水平增高。 家族复合性高脂血症： 病因是肝细胞产生apo-B过多。 家族性载脂蛋白B缺陷症： 病因是apo-B基因突变导致apo-B蛋白(LDL的主要蛋白)难于或不能被LDL受体识别，其LDL水平代于家族性高胆固醇血症。;III型高脂蛋白血症 几乎总是有载脂蛋白E的异常和血浆VLDL的转化和清除缺陷。;IV型高脂蛋白血症 是较常见的家族性疾病，常具有家族性分布，其特征是血液中富含VLDL的TG呈不同水平的增高，有易感动脉硬化症的可能性，常于青春期或成人期早期发病。;V型高脂蛋白血症 是一种较为少见的家族性疾病，其病因是内源性和外源性TG的清除功能存在缺陷，其特征是血液乳糜微粒和TG水平增高，而LDL和HDL水平降低，常于儿童或成年发病，易于发生危及生命的胰腺炎。;基因诊断 ;九、肝豆状核变性;肝豆状核变性的病因是位于人类染色体13q14.3～q21.1的ATP7B基因。 研究者已确认了可导致肝豆状核变性的200多个ATP7B基因突变位点，其中，约半数的突变导致ATP7B蛋白单个氨基酸的错误替换。;十、先天性甲状腺功能低下 ;十一、溶酶体病 ; ;十二、线粒体病 ;氧化磷酸化是指线粒体呼吸链电子传递过程中ADP生成ATP的过程。 线粒体呼吸链由5个酶多聚杂合复合体(I～V)组成，这些复合体均埋入线粒体内膜。5个呼吸链复合体中，有4个复合体同时含有nDNA和mtDNA编码的多肽链，它们分别是复合体I、III、IV和V