dna的生物合成复制药学.pptxVIP

复制（replication） 以亲代DNA为模板合成子代DNA，将遗传 信息准确地传递给子代的过程。 转录（transcription） 以DNA为模板，合成与DNA某段碱基序列互补 的RNA，将遗传信息传递给RNA的过程。 翻译（translation） 以mRNA为模板指导蛋白质生物合成的过程。;1958，Crick，中心法则(central dogma);逆转录(reverse transcription) 以RNA为模板指导DNA合成的过程。;; DNA 的生物合成——复制 RNA 的生物合成——转录 蛋白质的生物合成——翻译 基因表达调控与基因工程（自学）;第十章 DNA的生物??成——复制;第一节 DNA复制的基本规律;一、DNA复制是半保留复制 ;;复制方向与解链方向相反的子链，是不连续合成的，称随从链(lagging strand);;复制起点(origin, ori)是指DNA复制时特定的起始部位，通常有特定的核苷酸序列 原核生物一个ori ；真核生物多个ori 通常DNA复制是双向复制;;;四、DNA复制有方向性5’→3’;第二节 DNA复制的有关酶和蛋白质;DNA复制需要模板和底物 模板(template)----解开的2条DNA单链 原料----dNTP (dATP、dTTP、dCTP、dGTP）;(dNMP)n + dNTP → (dNMP)n+1 + PPi;一、DNA聚合酶是DNA复制的主要酶;;3’，5’-磷酸二酯键的形成;（一）原核生物的DNA聚合酶分为三型;;（二）真核生物的DNA聚合酶主要有五种;二、引物酶是一种特殊的RNA聚合酶， 用于引物的合成;1、解链酶(helicase); 2、拓扑异构酶（topoisomerase) * 能解开DNA超螺旋 * 有内切酶和连接酶功能;解链过程中正超螺旋的形成;3、单链DNA结合蛋白 (single strand DNA binding protein, SSB) 与解开的单链结合以稳定单链： ----防止DNA重新形成双螺旋 ----防止复制中单链模板被核酸酶水解 ----有激活DNA聚合酶的作用; 四、DNA连接酶用于连接DNA片段;第三节 DNA复制的过程;一、解链与螺旋构象变化;二、起始与引物RNA的合成;DNA聚合酶III催化dNTP在RNA引物的3’-OH端，以DNA的两条链为模板，合成两条新的DNA链。;四、RNA引物的水解;DNA聚合酶I 5’?3’聚合酶活性催化缺口的填补。 DNA连接酶 连接前一片段的3’-OH和后一片段的5’-P， 形成一条连续完整的子链。;;DNA聚合酶复制子链;六、真核染色体DNA在每个细胞周期 中只能复制一次（自学）;第四节 DNA的损伤和修复;（一）DNA突变的类型（自学）;（二）DNA突变的意义;二、损伤DNA的修复由一系列酶完成;三、切除修复是人体细胞修复DNA损伤的 主要方式;;切除??复;四、其他的修复方式;2、重组修复;DNA修复能力异常与衰老、肿瘤的发生有关。 着色性干皮病： 缺乏切除修复的酶；对日光或紫外线敏感； 易发生皮肤癌。;一、逆转录的概念 在某些情况下（如逆转录病毒）以RNA为模板合成DNA，称为逆（反）转录(reverse transcription)。逆转录酶(reverse transcriptase)即RNA指导的DNA聚合酶(RNA directed DNA polyrerase, RDDP ) 催化逆转录过程。;逆转录酶具有三种酶活性 * 病毒进入细胞，在胞液中脱去外壳； * RNA指导的DNA聚合活性，合成与病毒RNA 互补的DNA（complementary DNA, cDNA) ； * RNA水解酶活性，水解杂交RNA； * DNA指导的DNA聚合活性，以cDNA为模 板，形成双链DNA分子； * 新生的DNA分子，可整合到宿主细胞 染色体DNA中。;没有无校对功能，错误率高，易出新毒株。;二、逆转录病毒和癌基因 ;三、端粒酶是一种特殊的逆转录酶，具有 保持染色体完整性的功能（自学）;PCR 技术;PCR反应体系：;（一）名词 中心法则；半保留复制；冈崎片断 ;1、中心法则、半保留复制的概念 2、参与DNA复制的物质（模板、底物、引物、DNA 聚合酶、引物酶、DNA解旋酶、拓扑异构酶、单链DN