免疫标准操作程序SOP.pdfVIP

芜湖市第二人民医院检验科标准操作文件 1 标准操作程序 项 目 甲型肝炎病毒 IgM 检测的标准操作程序 方 法 ELISA 方法 编写人 冯岚 日期 2005/01/01 审核人 曹进平 日期 2005/01/01 批准人 陈健康 日期 2005/01/01 文件分发部门和 / 或个人 免疫室，医务科 本规程自 2005 年 01 月 01 日起实施，每 2 年复审一次 文件编号 CHDEYY-JYK-MY-001 文件版本号 第 1 版 医务科保管者 院长办公室保管者 院档案室保管者 检验科主任 操作人员 部门主管 质量负责人 姓名 冯岚 曹进平 陈健康 日期 2005/01/01 2005/01/01 2005/01/01 芜湖市第二人民医院检验科标准操作文件 2 实验室名称 项目 编号 制定日期 芜湖市第二人民医院 甲型肝炎病毒 IgM 检测的标 WHDRYY-JYK-MY-001 2005-01-01 检验科免疫室 准操作程序 共 2 页 第 1 页 [ 目的] 保证检测结果准确可靠。 [ 该 SOP 变动程序 ] 本标准操作程序的变动，可由任一使用本 SOP 的工作人员提出，并报经专业主管、科主任 批准签字。 [ 标本的采取和保存 ] 采静脉血 2ml ，分离血清备用。也可以使用血浆标本进行检测。标本宜新鲜，无污染，避免 溶血，避免反复冻融，不可用 NaN 3 防腐。 [ 测定原理 ] 采用兔抗 -人 IgMu 链包被反应被，加入待测标本，同时加入 HAVAg ，抗 HAV-HRP ，如待测 标本中含有抗 -HA V-IgM 时， 就能与包被兔抗 -人 IgMu 链结合， 并且与 HAVAg, 抗 -HA V-HRP 结合成复合物，加 TMB 底物产生显色反应，反之则无显色反应。 [操作步骤 ] 1. 将待测标本用生理盐水作（ 1：1000）稀释，每孔加入稀释标本 100ul ，设阴、阳性对照 各 2 空，每孔加入阴性对照（或阳性对照） 100ul （或2 滴），并设空白对照一孔，封板， 置 37 度孵育 20 分钟。 2. 洗板机洗板：选择洗涤 5 次程序洗板后拍干。手工洗板：弃去孔内液体，洗涤液注满各 空，静置 5 秒，甩干，重复三次后拍干。 3. 每孔加入 HAVAg30ul （或一滴），酶结合物 50ul （或一滴），（空白对照孔不加） ，充分混 匀，封板，置 37 度孵育 20 分钟。 4. 洗板机洗板：选择洗涤 5 次程序洗板后拍干。手工洗板：弃去孔内液体，洗涤液注满各 空，静置 5 秒，甩干，重复三次后拍干。 5. 每孔加显色剂