高温高压膨化法降解小麦中脱氧雪腐镰刀菌烯醇和降解产物.docVIP

PAGE PAGE 10 高温高压膨化法降解小麦中的脱氧雪腐镰刀菌烯醇及降解产物解析的研究 胡学春1 任凌云1 王丽娟2 王骏3 张艳侠3 金增伟1 吴真真1 王瑞杰1 郭启雷4 （山东省粮油检测中心 1 ，济南, 250101） （山西粮食质量监测中心 2 ，太原，030024） (山东省食品药品检验研究院 3 ,济南, 250101） (安捷伦科技（中国）有限公司 4 ,北京, 100102) 摘 要 本文研究了高温高压膨化法降解小麦中的脱氧雪腐镰刀菌烯醇（俗称呕吐毒素，Deoxynivalenol，DON）的条件，确定了压力是影响降解结果的关键因素，在压力为1.3 Mpa时DON的降解率为61.9%~81.1%，降解产物经超高效液相串联四极杆飞行时间质谱仪(UHPLC-QTOF-MS)定性分析，得到至少5个降解产物，通过对主要降解产物的结构解析，确定了主要降解产物的分子式、分子质量和分子结构式。DON的重要毒位点3-OH的β、α异构化和内醚的水化反应，对DON毒性的降低意义重大，降解产物之一3-epi-DON的毒性是DON的1/350。 关键词 小麦 高温高压膨化法 脱氧雪腐镰刀菌烯醇（呕吐毒素） 降解 分子质量 分子结构式 中图分类号：TS201.7 文献标识码：（A ） 文章编号：（1003-0174） 0 前言 脱氧雪腐镰刀菌烯醇，化学名称3β，7α，15-三羟基-12、13-环氧单端孢酶-9-烯8酮，Cas号【51481-10-8】。是由镰刀菌产生的单端孢族化合物中的一种，属于?类单端孢霉烯族毒素，是一种有毒的次级代谢产物[1] ，因动物食后呕吐，又名呕吐毒素。 图 SEQ 图 \* ARABIC 1 DON分子结构式小麦在生长期、成熟期和收获期，都可感染呕吐毒素。镰刀菌能在1～39 图 SEQ 图 \* ARABIC 1 DON分子结构式 收稿日期：2020-04-02 作者简介：胡学春，男，1965年出生，高级工程师，粮油检验与食品安全 适产毒温度通常在8～12 ℃之间。土壤包含了自然界几乎所有菌类，中国高产量的方法之一是密集种植，阳光不能照射土壤杀死其中的真菌，当遇到阴雨连绵，温度湿度适宜时，土壤中的真菌快速繁殖，小麦通过根系把土壤中的真菌吸收进入果实。在成熟期，小麦果壳张开，尤其是在淮河流域，此时正是梅雨季节，雨水进入籽粒果壳内，果壳降温收缩闭合，包含住雨水，此时温度高、湿度大，小麦籽粒特 别容易感染真菌。在收获期，粮食籽粒特别是在胚芽部，此处水分大、富含糖、脂肪和蛋白质，是真菌的良好培养基，适宜真菌的快速生长。 2006年，欧盟规定呕吐毒素在粗谷物中的最大限最为1250 μg/kg[2]。2001年食品添加剂联合专家委员会（JECFA）第56次会议首次对DON进行了评估，根据毒理学实验结果，JECFA提出DON的暂定每日最大耐受摄入量( provisional maximum tolerable daily in-take，PMTDI)为1μg /(kg·bw)。2010年JECFA第72次会议维持了DON的PMTDI值为1μg /(kg·bw)，[3] [4]。我国GB 2761-2017中规定小麦及其制品中DON的最大允许限量为1000 μg /kg[5] 。 目前，国内研究小麦（粮食）中DON降解的主要方法有风选除去赤霉病粒、紫外线照射法；臭氧水浸泡法降解赤霉病小麦中的 DON[6]，DON的降解率可达19.99 %，增大浓度、延长浸泡时间，降解率最大可到44.12 %；生物发酵法降解粮食及其制品中真菌毒素[7]，酒糟降解后DON的含量≦500 μg/kg，还有蒙脱石物理吸附法、氨发酵法等。粮食中真菌毒素的降解已经成为科研人员的研究重点。 本研究分析了小麦中DON的降解方法及降解产物，感染DON的小麦经高温高压膨化处理，不添加任何化学试剂，可使DON降解率达61.9%~81.1%，降解产物经UHPLC-QTOF-MS分析，通过全扫描模式采集数据，利用设备配置的粒子群优化算法（Particle?Swarm?optimization, PSO），对不同质核比范围内分段优化，考虑同位素权重计算精确质量数，利用分子式生成（MFG）功能生成元素组成，通过二级质谱图检索比对谱库（PCDL库），与谱库已知化合物分析确认降解产物的分子式，根据DON的已知结构和化学键能推测可能的分解产物，通过仪器内置的结构解析辅助软件（MSC），对未知结构进行推断，得到至少5个分解产物，确定降解产物可能的分子结构，降解产物之一3-epi-DON的毒性是DON的三百五十分之一 [6]。 材料与方法 1.1材料与仪器 1.1.1材料 污染DON不同程度的小麦 ，1#小麦DON含量731 μg/kg、2#小麦D