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舒筋通络颗粒中乳香挥发油提取及包合工艺研究 舒筋通络颗粒是由骨碎补、牛膝、川芎、天麻、黄芪、威灵仙、地龙、葛根和乳香制成的中药颗粒，系神威药业集团独家上市的新药，已被2021年版《中华人民共和国药典》收录，具有补肝益肾、活血舒筋之功效，适于治疗颈椎病之肝肾阴虚、气滞血瘀证，头晕、头痛、胀痛或刺痛，耳聋、耳鸣，颈项僵直，颈、肩、背疼痛，肢体麻木，倦怠乏力，腰膝酸软，口唇色暗，舌质暗红或有瘀斑等，对治疗神经根型、椎动脉型和脊髓型颈椎病亦有疗效[2-4]。乳香为方中的要药，主要起活血化痰、消肿止痛、祛腐生肌的功效，乙酸辛酯是乳香挥发油的主要成分[5-7]，其留存在药品中的量越多，效果越好。 植物中提取挥发油的方法主要有压榨法、溶剂回流浸取法、微波辅助法、超临界流体萃取法、水蒸气蒸馏法、水酶法等[8-11]。本研究采用水蒸气蒸馏法，以挥发油得率为考核指标，优选乳香挥发油提取工艺。为提高挥发油在制剂中的稳定性，采用β-环糊精包合，并以包合率及包合物得率为考核指标，采用正交试验优选包合工艺，比较包合方式的各自优势。 1主要仪器与试药 *****-RLC-210.4电子分析天平，梅特勒-托利多仪器（上海）有限公司提供；电热真空干燥机，贵阳新奇微波工业有限责任公司提供；配液小罐，浙江苍南县立瓯石化设备有限公司提供；DFY-00型粉碎机，浙江温岭市大德中药材器械厂提供。 乳香药材，经河北省药品检验研究院中药师孙宝惠主任鉴定为木兰科八角茴香正品；β-环糊精，安徽山河药用辅料股份有限公司提供。 2实验部分 2.1舒筋通络颗粒制备工艺 将乳香以外的药材按规定提取，干燥成浸膏粉，采用水蒸气蒸馏法提取挥发油，收集挥发油，以β-环糊精包合，将包合物与浸膏粉、辅料、矫味剂混匀，制粒即得。 2.2乳香挥发油提取工艺条件的优化 2.2.1正交试验 影响挥发油提取的主要因素有浸泡时间、药材粒径、加水量、提取时间等。本研究采用L9（34）正交表进行试验，选择浸泡时间（A）、药材粒径（B）、加水量（C）、提取时间（D）为考察的4个因素，以挥发油收率为评价指标，优化提取工艺。因素与水平见表1，正交试验设计与结果见表2，方差分析结果见表3。 2.2.2正交试验结果分析 在设计的因素水平范围内，从方差分析结果可知各因素对结果的影响顺序为DCAB。其中，加水量（C）、提取时间（D）具有极显著性影响，浸泡时间（A）、药材粒径（B）无显著性影响。综合考虑后确定舒筋通络颗粒中乳香油提取工艺水平的最优组合为A1B1C1D3。 2.2.3工艺验证 按优化后的工艺条件，提取6 批（每批藥材量50 kg）乳香挥发油，收率分别为1.4%，1.5%，1.4%，1.4%，1.5%和1.5%，均值为99.72%，RSD值为0084%（n=6） 。结果均在预测范围内，重现性良好，证明优化工艺条件可行。 2.3乳香挥发油包合工艺 2.3.1包合物的制备 常用的挥发油包合方式有2种[13-14]：饱和水溶液法和胶体磨法。 1）饱和水溶液法取称量好的β-环糊精，用纯化水搅拌后加入到配液小罐中，加热至规定温度，同时开启搅拌桨持续搅拌，溶液呈透明状时停止加热。待溶液温度降至规定温度，将用等量95%（体积分数，下同）乙醇稀释后的乳香油缓缓加入到β-环糊精溶液中，边加边搅拌，到达规定时间后放出，置冷库冷藏24 h，用约0.074 mm（200目）的滤布过滤，滤渣用水洗涤后再用乙醚洗涤至无乳香油味，置于烘箱中于60 ℃以下干燥，粉碎即得。 2）胶体磨法取一定量的β-环糊精，加入一定量的水，搅拌，加入到胶体磨中研磨至规定时间，缓慢加入乳香油，研磨至规定时间，低温冷藏24 h，用约0074 mm（200目）的滤布过滤，将滤渣用水洗涤后再用乙醚洗涤至无乳香油味，置于烘箱中于60 ℃以下干燥，粉碎即得。 2.3.2空白回收率的测定 包合物包合完成、冷藏过夜后，需用无水乙醇或其他有机试剂将未包合的挥发油洗去，抽滤，然后得到的就是包有挥发油的包合物。将此包合物干燥后，放入挥发油提取器，提取出来的油就是被包合的油。取1 mL挥发油，在该挥发油提取器中进行测定，按式（1）计算空白回收率： 空白回收率=实际收油量投油量×100%。（1） 2.3.3包合率及包合物得率的测定 将所得干燥包合物精确称定，置于1 000 mL圆底烧瓶中，加入400 mL蒸馏水，分别按《中华人民共和国药典》2021年版“挥发油测定法”提取挥发油，至挥发油体积不再增加为止，读取体积，计算挥发油包合率和包合物得率，分别见式（2）和式（3）： 挥发油包合率=实