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转入外源生长激素基因的“超级小鼠” ;转基因斑马鱼;转基因技术是在离体条件下, 利用DNA重组技术对不同生物个体的DNA进行加工, 将具有某一特性(如抗性、耐性和生长性能等)的外源基因通过适当的载体整合到动物体内、使其表达并获得新的生物机能。
;动物基因工程的技术流程;一、基因工程策略的制订与目的基因的选择与克隆;二、载体的选择和表达载体的构建及表达鉴定;比如,对于基因治疗而言,一般用定位整合载体;
对于牛乳腺生物反应器而言,采用质粒型表达载体,其外源基因在乳腺中得到较高水平表达。;动物遗传转化与转基因动物再生;(一)反转录病毒法;关键步骤;(二)DNA微注射;操作流程;(1)、受精卵的采集(以小鼠为例);(2)受精卵的显微注射;(3) 受精卵的移植;(4) 得到转基因小鼠
(5) 对转基因小鼠进行鉴定、筛选、杂交获得纯合转基因小鼠。
;(三)胚胎干细胞介导法 (ES细胞法);原理;主要流程;(四)体细胞核移植法;什么是体细胞核移植?;关键环节;技术线路图;动物基因工程应用;1、研究基因的结构和功能及其表达与调控;利用基因同源重组进行基因敲除;条件性基因敲除法;RNAi引起的基因敲除;2、品种改良;3、生物反应器生产重组蛋白;转基因动物生物反应器多以乳腺、唾液腺、血液和膀胱为靶位,其中乳腺最常见,因为乳汁可以连续分泌,流体含量丰富,且所产的异源蛋白对人体不产生免疫反应。;4、异种器官移植;建立HLA转基因猪:采用转基因技术将人体相容性抗原如HLA-D,HLA-G等基因转移至猪体内表达,建立HLA转基因猪,这样的转基因猪用于人体器官移植的供体,将会具有较低的免疫排斥。
建立人补体调节蛋白CD55、CD59等转基因猪:通过将人体CD55、CD59基因转入猪的基因组中,其猪仔的血管内皮细胞会表达CD55、CD59。当携带这种基因的猪器官移植到人体后,将不会激活人的补体系统,因此可以克服超急性排斥。;5、构建医学动物模型;6、基因治疗;首例基因治疗的受益者 (美国1990年);1990年美国国立卫生研究院治愈一位“重症联合免疫缺陷综合症”的4岁女孩
ADA基因缺陷
ADA:腺苷酸脱氨酶;载体;基因治疗的分类
体外基因治疗:先从病人体内获取某种细胞,例如T淋巴细胞,进行培养,然后,在体外完成基因转移,再筛选成功转移的细胞扩增培养,最后重新输入患者体内。
体内基因治疗:直接向人体组织细胞中转移基因的治病方法。
;米有了;转基因斑马鱼;动物基因工程的技术流程;(1)、受精卵的采集(以小鼠为例);(2)受精卵的显微注射;(三)胚胎干细胞介导法 (ES细胞法);关键环节;动物基因工程应用;5、构建医学动物模型
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