最新 补体介导的细胞毒试验.pptVIP

烦恼有何惧怕，既然躲不掉，就调好心态与它共存。心向阳光，何惧风霜。茫茫人海你我相遇就是缘分，欢迎下载！ 补体介导的细胞毒试验 实验原理 带有特异抗原的淋巴细胞(靶细胞)在体外与相 应抗体结合后,在补体的参与下,引起靶细胞的死 亡。靶细胞的杀伤与否可借助染料(伊红y)排斥现象 判定。利用细胞毒试验可以检查细胞膜抗原,亦可鉴 定抗体的特异活性。 抗原是小鼠脾细胞，在体外利用抗小鼠脾细胞 抗体通过补体的协同作用,可杀伤95%以上的小鼠脾 细胞。 实验方法 1、小鼠脾细胞悬液的制备: 1）4～6周龄小鼠拉颈椎处死,取出脾脏放入已加入 4ml左右的冷Hanks’液的平皿中，用100目的不锈钢 网研磨后，经尼龙布过滤，放入试管。 2）离心1000 rpm 5分钟，洗1次。 3）将沉淀重悬于6ml冷Hanks’液中，配成1×107/ml细胞浓度。 2、取试管3支,标明顺序，按下表操作： 试验材料 试验管 补体对照 细胞对照 1×107/ml小鼠脾细胞 0.1ml 0.1ml 0.1ml 抗小鼠脾细胞抗体 0.1ml --- --- Hanks’液